PANDNA试剂盒包含3个洗涤缓冲液(CW1,CW2和PW1),以提取各种样品类型。CBB套件仅包含2个洗涤缓冲液(CW1和CW2)。缓冲CW1,CW2和PW1作为浓缩物提供。CW1和CW2的最终乙醇浓度使用60%。PW1最终乙醇浓度使用70%。在使用之前,如瓶子上所示,将适当的乙醇量(96-100%)添加到缓冲液CW1,CW2和PW1中。
PANDNA试剂盒包含3个洗涤缓冲液(CW1,CW2和PW1),以提取各种样品类型。CBB套件仅包含2个洗涤缓冲液(CW1和CW2)。缓冲CW1,CW2和PW1作为浓缩物提供。CW1和CW2的最终乙醇浓度使用60%。PW1最终乙醇浓度使用70%。在使用之前,如瓶子上所示,将适当的乙醇量(96-100%)添加到缓冲液CW1,CW2和PW1中。
PANDNA试剂盒包含3个洗涤缓冲液(CW1,CW2和PW1),以提取各种样品类型。CBB套件仅包含2个洗涤缓冲液(CW1和CW2)。缓冲CW1,CW2和PW1作为浓缩物提供。CW1和CW2的最终乙醇浓度使用60%。PW1最终乙醇浓度使用70%。在使用之前,如瓶子上所示,将适当的乙醇量(96-100%)添加到缓冲液CW1,CW2和PW1中。
缓冲液优化用于用Quantinova逆转录酶进行逆转录的缓冲液;包含寡-DT和随机引物的优化组合,其中包括Mg 2+和DNTP。它允许从所有RNA转录物的所有区域,即使是从5'区域产生的。
PANDNA试剂盒包含3个洗涤缓冲液(CW1,CW2和PW1),以提取各种样品类型。CBB套件仅包含2个洗涤缓冲液(CW1和CW2)。缓冲CW1,CW2和PW1作为浓缩物提供。CW1和CW2的最终乙醇浓度使用60%。PW1最终乙醇浓度使用70%。在使用之前,如瓶子上所示,将适当的乙醇量(96-100%)添加到缓冲液CW1,CW2和PW1中。注意:并非所有缓冲区都在每个过程中使用。
为了获得更好的结果,Roche提供了各种外部裂解缓冲液:Magna Pure CFNA缓冲套件(CAT。否。07 794 398 001),Magna纯外裂解缓冲区(Cat。否。06 374 913 001),Magna纯细菌裂解缓冲液(Cat。否。06 374 921 001),Magna纯DNA组织裂解缓冲液(Cat。否。06 640 702 001),Magna Pure FFPET缓冲区集†(Cat。否。08 447 144 001),Magna Pure RNA组织裂解缓冲液(Cat。否。03 604 721 001)和S.T.A.R.缓冲区§(CAT。否。03 335 208 001)。请参阅使用手册的说明以获取更多详细信息。
我们的新丹南微生物组粪便DNA试剂盒比我们的原始微生物组粪便技术更有效,并且旨在将纯微生物DNA的高产量与粪便样品分离,用于微生物组和宏观分析。该套件具有新型的微生物DNA柱和优化的化学性质,以更有效地去除PCR抑制剂(例如多糖,血红素化合物和胆汁盐),使用新型的微生物组裂解缓冲液和微生物组降水缓冲液在这种过程中,在这种过程中,微型机构是有效地使用了散热器的,并且是由热量进行的。蛋白质和抑制剂通过降水使用新的专有抑制剂去除缓冲液消除,随后通过离心与珠子和未溶解的样品材料结合。将纯化的裂解物与结合缓冲液混合,然后应用于微生物DNA柱。与柱结合的DNA经历了两个洗涤步骤。在干燥步骤后,可以用DNA进行NG,PCR和其他下游应用,可以用洗脱缓冲液(5 mm Tris/HCl,pH 8.5)洗脱。
0.5 g称重为聚丙烯离心管(50 mL体积),并使用离子 - 脱位树脂类型的DNA提取和纯化试剂盒(Qiagen Genomic-TIP)提取DNA并纯化DNA。在样品中加入7.5 ml的G2缓冲液 *1和20μL-淀粉酶 *2,与涡旋混合器剧烈混合,并在37°C下孵育1小时。加入7.5 mL的G2缓冲液,200μl蛋白酶K*3和20μlRNASEA*4,搅拌直至样品保持在管的底部,并在50°C下孵育1小时。同时,将离心管反转2-3次以混合样品。接下来,在4°C下在5,000 x g处离心15分钟,然后将所得的上清液(在2 mL部分中)转移到五个2 ml管(总计10毫升) *5中,在4°C下在20,000 x g处离心15分钟。从每2毫升管中收集1 ml上清液,以提前用1 mL qBT缓冲液 *1平衡的Qiagen Genomic-TIP 20/g,并提前加载(总计5 mL)。然后用QC缓冲液 *1洗涤尖端3次,然后转移到新的离心管和预热的QF缓冲液
管式试剂盒设计用于中低通量(少于 8 个样本)。它可根据制备次数进行调整,有助于有效节省试剂。板式试剂盒可提取 16 个样本,每次提取使用六个连续的孔。这六个孔水平排列,每个孔都装有用于提取过程的特定试剂。这两种试剂盒可以与相同的硬件一起使用,从而允许用户根据样本的要求在两种方法之间切换。第 1(第 7)个孔含有裂解缓冲液,它可以破坏细胞膜并通过磁珠结合目标 DNA 和 RNA。在开始提取时,存储在第 4(第 10)个孔中的磁珠会被移至第 1(第 7)个孔。第 2、第 3、第 4、第 6(第 8、第 9、第 10、第 12)个孔含有洗涤缓冲液,以去除不需要的细胞成分和缓冲液。洗脱缓冲液位于第 5 个(第 11 个)孔中,有助于核酸分子从磁珠中溶解。