XiaoMi-AI文件搜索系统
World File Search System补充性
补充数据补充图 1.门控......
补充图 1。流式细胞术分析的门控策略。（A）主要外周血淋巴细胞的门控策略。从前向散射面积与侧向散射面积点图中选择淋巴细胞，随后在前向散射面积与前向散射高度点图中选择单个细胞。然后，通过 CD3+ 表达选择 T 细胞，并通过 CD8 vs CD4 点图识别 CD8+ 细胞毒性和 CD4+ 辅助 T 细胞。NK 细胞被识别为 CD3- 和 CD56+ 和/或 CD16+ 淋巴细胞，并在 CD16 vs CD56 点图中选择 CD56 亮 CD16-、CD56 暗 CD16+ 和 CD56-CD16+ 功能亚群。B 细胞被选为 CD3-CD19+ 淋巴细胞。对于浆细胞，先进行前向散射面积与侧向散射面积点图，然后再进行单个细胞选择。然后，将 CD19+ 细胞门控为 B 细胞谱系，将 CD20-CD38 bright 定义为浆细胞。（B）B 谱系主要成熟阶段的门控策略。从 CD19+CD20+ B 细胞开始，选择过渡 B 淋巴细胞作为 CD27-CD10+ 细胞。在侧向散射面积与 CD27 点图中选择了 CD27+ 和 CD27- 细胞。从 CD27- 亚群中，我们在 IgD 与 IgM 图中鉴定了幼稚（IgD+IgM- 或 IgD+IgM+）和 IgD-IgM- 亚群；从 CD27+ 亚群和相同的 IgD 与 IgM 图中，我们鉴定了未切换记忆（IgD+IgM+）、仅 IgM 记忆（IgD-IgM+）和类别切换记忆（IgD-IgM-）亚群。 (C) 循环 Tfh 淋巴细胞的门控策略。通过 CXCR5 和 PD-1 的双阳性染色从 CD4+ T 细胞中筛选出循环 Tfh 淋巴细胞。分析该群体的 CCR7 表达情况。
特别补充
1981 年，在我 25 岁生日之际，我驾驶一架早期设计的悬挂式滑翔机从约塞米蒂 3,200 英尺高的悬崖（冰川点）上飞下。飞行前几天，我带着我未来的妻子一起视察了发射场，实际上是一块花岗岩板，向下俯冲到山谷下方。我们互相看了看，我们的表情都表达了我们共同的结论……我快要死了！通常我的飞行都是从平缓的山坡和倾斜的地形开始的，而不是如此严重的悬崖。当我小心翼翼地带着我的铝和织物滑翔机穿过花岗岩悬崖时，约塞米蒂的早晨空气静止。根据现场协议，发射经理确认了我的安全带附件并评估了我的心理决心。聚集的旁观者变得严肃起来。当我大喊“好吧，寻求刺激的人……让我们开始吧！”时，可以听到几声笑声和紧张的笑声。尽管这有悖常理，但我还是头朝下跑下山，以确保在 7,200 英尺的稀薄空气中成功起飞。大地塌陷，留下了约塞米蒂山谷的壮丽景色。从一个相对较少人享受过的有利位置，我绕着阿瓦尼酒店上空盘旋，向在吊床上攀岩的酋长岩的攀岩者欢呼。在空中停留的时间比我希望的要短，我降落在一片田园诗般的草地上，受到了最热烈的欢迎。手拿一杯香槟（你只有一次 25 岁！）我思索着生活怎么可能比这更好。
补充材料
图S1。 GSK3β与PRR11相互作用，并影响PRR11降解。 （a）分析GSK3β肽通过质谱法与PRR11蛋白相互作用的能力。 （b）用FLAG-GSK3β和HA-PRR11质粒转染了293T细胞，HA-PRR11和FLAG-GSK3β的Western blot分析在用HA和FLAG抗体分析后进行。 （c）IP分析用针对GSK3β（TOP）和PRR11（底部）的抗体分析IP分析后，Caki-1细胞中PRR11和GSK3β的蛋白质印迹分析。 （d）IP分析后，ACHN细胞中GSK3β的Western印迹分析，抗体抗体对PRR11。 （E）GSK3β在RCC细胞中沉默或过表达，通过QRT-PCR分析验证了GSK3β和PRR11的转录水平（n = 3个生物学独立实验）。 （F-G）RCC细胞用FLAG-GSK3β或SIGSK3β转染，并通过Western Blot分析验证PRR11蛋白表达。 （h）在暴露于DMSO或CHIR-99021（10μM）处理的ACHN细胞后，在指定的持续时间内，对PRR11（TOP）进行了蛋白质印迹分析。 PRR11半衰期的定量（底部，n = 3个生物学独立实验）。 （i）转染后HA-PRR11的蛋白质印迹分析图S1。GSK3β与PRR11相互作用，并影响PRR11降解。（a）分析GSK3β肽通过质谱法与PRR11蛋白相互作用的能力。（b）用FLAG-GSK3β和HA-PRR11质粒转染了293T细胞，HA-PRR11和FLAG-GSK3β的Western blot分析在用HA和FLAG抗体分析后进行。（c）IP分析用针对GSK3β（TOP）和PRR11（底部）的抗体分析IP分析后，Caki-1细胞中PRR11和GSK3β的蛋白质印迹分析。（d）IP分析后，ACHN细胞中GSK3β的Western印迹分析，抗体抗体对PRR11。（E）GSK3β在RCC细胞中沉默或过表达，通过QRT-PCR分析验证了GSK3β和PRR11的转录水平（n = 3个生物学独立实验）。（F-G）RCC细胞用FLAG-GSK3β或SIGSK3β转染，并通过Western Blot分析验证PRR11蛋白表达。（h）在暴露于DMSO或CHIR-99021（10μM）处理的ACHN细胞后，在指定的持续时间内，对PRR11（TOP）进行了蛋白质印迹分析。PRR11半衰期的定量（底部，n = 3个生物学独立实验）。（i）转染后HA-PRR11的蛋白质印迹分析