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World File Search System逆转录
话题：基因操控
基因克隆是指分离目标 DNA 序列以复制多个副本的过程。目标基因被分离（通过 PCR），然后插入质粒载体（通过消化和连接）。质粒载体能够在宿主细胞内自主复制，确保序列被克隆。重组载体可用于创建转基因生物 (GMO)，进而可用于生产大量治疗性蛋白质（生物制药）。基因克隆的过程涉及多个步骤：•用聚合酶链式反应（PCR）分离和扩增目的基因（和质粒载体）•如果要将基因整合到细菌细胞中，则需要 cDNA 拷贝（逆转录）•用相同的特异性限制性酶（平端或粘端）消化基因和质粒载体•通过将目的基因连接到质粒载体（使用 DNA 连接酶）来创建重组质粒•通过凝胶电泳将重组质粒与正常质粒（没有目的基因）分离•通过载体递送方法（例如电穿孔）将重组质粒引入靶细胞•在抗生素培养基中培养细胞以选择修饰细胞（只有带有质粒的细胞才具有抗生素抗性）
LINE-1，核仁组织的北极星
长期散布的元素-1（LINE-1）反转座子是哺乳动物杂物中丰富的转座元件，代表了人类或混血基因组的几乎五分之一。他们的高拷贝数来自逆转录位置，这是一种副本和糊状机制，通过该机制，线1元素在整个镀铬中散布，并在新的Geno-Mic位置引入顺式调节元素。尽管只有相对较小的line-1元素在现代人类中仍具有跨位置活跃，从而导致遗传变异和偶尔遗传疾病，但它们的过去活性具有深远的高阶基因组结构和功能。行1元素积聚在B室（与抑制染色质相关的拟菌素结构域）中，并在核和核仁周围的建立和/或增强和聚集（Solo-Vei等人。2016; Lu等。2021）。一致地，线1元素与Giemsa/quinarcine-阳性带（g/q频段）密切相关，该带表示代表中期染色体上的杂化物（Solovei et al。2016）。在更具区域规模的情况下，行1元素经常con-
crispr是一种有用的生物学工具，用于检测人类临床样品中SARS-COV-2的核酸
新型冠状病毒病（Covid-19）最近大流行已在全球范围内传播并感染了数百万人。对严重急性呼吸综合征2（SARS-COV-2）的核酸的快速检测仍然是医疗保健提供者中的挑战。当前，定量逆转录 - 聚合酶链反应（RT-QPCR）是一种广泛使用的方法，可检测人类临床样品的SARS-COV-2。RT-QPCR是昂贵的设备，需要熟练的人员以及冗长的检测时间。RT-QPCR限制需要一种替代的医疗保健技术来克服快速，更便宜的检测方法。通过应用CRISPR技术原则，这是几种有前途的检测方法，为医疗保健社区提供了希望。基于CRISPR的检测方法包括Sherlock-Covid，stop-covid，aiod-crispr和检测平台。这些方法具有比较优势和缺点。在这些方法中，如果我们比较测试所花费的时间，与每个测试相关的成本以及它们在临床样本中检测SARS-COV-2的能力，则AIOD-CRISPR和检测是比其他方法更好的诊断方法。可能希望基于CRISPR的有前途的方法将促进CRISPR构建的下一代新型冠状病毒诊断中的护理点（POC）应用。
人类内源性逆转录病毒（HERVS）：塑造癌症中的先天免疫反应
摘要：人内源性逆转录病毒（HERV）占人类基因组的8％。这些序列是外源性逆转录病毒从古代种系感染中的残留物。经过数百万年的发展和多个整合，赫尔夫（Hervs）获得了许多损害，使它们有缺陷。在稳态下，HERV主要位于异染色质中，并被甲基化沉默。已经描述了多种疾病是为了引起其重新激活，包括自身免疫性疾病和癌症。HERVS重新表达导致RNA（简单和双链）和DNA产生（通过逆转录），从而调节先天免疫反应。一些研究还主张了HERV在塑造先天免疫演变中的作用，尤其是在干扰素反应的发展中。然而，它们在先天免疫反应中，尤其是在癌症中的确切作用尚待定义。在这篇综述中，我们看到HERV如何成为安装抗肿瘤免疫反应的关键人物。在简要介绍了HERVS特征和生物学之后，我们回顾了Hervs可以与免疫系统相互作用的不同机制，重点是天生的反应。然后，我们讨论了HERV表达对癌症先天免疫反应的潜在影响。
基于纤维素的超室温磷光纳米材料，具有可调颜色和高量子的产量，可通过纳米表面约束效应
如何实现多色有机室温磷光（RTP）仍然具有挑战性和引人注目。在此，我们发现了一个新的原则，可以根据纳米表面限制效应来构建生态友好的色彩可调RTP纳米材料。纤维素纳米晶体（CNC）固定纤维素衍生物（CX）通过氢键相互作用，含有芳基取代基，这有效地抑制了纤维素链和发光基团的运动以抑制非辐射过渡。同时，具有强氢键网络的CNC可以隔离氧气。CX调节磷光发射。直接混合CNC和CX后，获得了一系列多色RTP纳米材料。可以通过引入各种CX和CX/CNC比的调节来对所得CX@CNC的RTP发射进行细微调整。这样的通用，便捷且有效的策略可用于制造具有宽色调的各种彩色RTP材料。由于纤维素的完整生物降解性，可以将多色磷光CX@CNC纳米材料用作环保安全墨水，以通过常规的打印和写作过程来制造一次性的抗抗逆转录注力标签和信息存储模式。
DNA-DNA滑动摩擦和非平衡动力学在病毒基因组喷射和包装中的作用使用RNA
β-Mercaptoethanol PanReac-AppliChem A4338,0100 Sodium chloride (NaCl) PanReac-AppliChem 131659.1211 Tryptone Condalab 1612 Yeast Extract Condalab 1702 Bacteriological Agar Condalab 1800 Agarose D1 Medium EEO Condalab 8019 Liquid nitrogen n/a n/a Critical commercial assays NEBuilder® HiFi DNA Assembly Master Mix New England Biolabs E2621S Phusion TM High-fidelity DNA polymerase Thermo Fisher Scientific F530S MluI (10 U/µL) Thermo Fisher Scientific ER0561 BsaIHF®v2 (20 U/µL) New England Biolabs R3733S DNA Clean & Concentrator TM -5 Zymo研究D4004Nucleospin®质粒DNA纯化机构 - 纳格尔740588.250 Ribolock RNase抑制剂（40 u/μl）Thermo Fisher Scientific EO0381恢复TM逆转录（TM）逆转录酶Thero Fisher Fisher Fisher Scientific EP0441 Therus prolainsir prolapers themophirs dna Polymsisriast dna Polymsiss dna Prolymasse：003 3.003.003 3.003 3.003 3.003 3.003 3.003 3.003; 003 3.003 3.003 Nicotiana Benthamiana cas9（Bernabé-ortts等，2019）N/A寡核苷酸D2409 atttatattattAttCataCaatCaaAcc
案例报告的步态改善和与目标导向
摘要：Angelman综合征是一种以运动和认知发育延迟为特征的遗传神经行为综合征，活动和参与严重减少。治疗有限，尚未研究康复的影响。我们报告了一个7岁男孩患有Angelman综合征的进展，此前是涉及跨语言神经刺激（TLN）和面向目标的康复以改善步态的创新协同干预措施。对父母的能力和参与水平和三维步态分析进行了采访，在4周干预（每周五天，每天4小时）和6个月后进行了三维步态分析。时空和运动学步态变量在4周时大大改善，下肢激动剂 - 抗逆转录剂的合同减少，步行距离较大（从500 m到2 km）。孩子的参与度和进行日常生活活动的能力得到了改善，以及干预措施不针对的几个功能。干预措施六个月后，部分持续了改善。运动能力的快速和相当大的证据可能是由于TLN对康复的增强。需要进一步的研究来了解这种作用的基础机制，并确定它是否可以推广到其他类似疾病的儿童。
呼吸障碍的器官模型揭示了由phox2b-parms引起的后脑神经元的图案缺陷
脑干中的逆转录核（RTN）神经元调节对高碳酸高的通气反应。目前尚不清楚Phox2b-多酰氨酸重复突变（PHOX2B -PARMS）如何改变Phox2b和扰动RTN神经元的形成的功能。在这里，我们用人类多能干细胞的RTN样神经元产生了人类脑干器官（HBSO）。单细胞转录组学表明，phox2b+7ala parm的表达改变了后脑神经元的分化轨迹，并阻碍了HBSOS中RTN样神经元的前瞻性。使用无引导的大脑器官（HCO），PHOX2B+ 7ALA PARM中断了刺猬途径和HOX基因失调的Phox2b+神经元的模式。通过互补使用HBSO和HCO与患者和两个突变体在PHOX2B中携带不同多丙氨酸重复的多能干细胞系，我们进一步定义了多苯胺反复的长度与RTN呼吸中心的畸形与RTN呼吸畸形的长度与RTN的畸形与毒素毒素的疾病型模型的潜在模型，并展示了phox2-Persias的潜在模型，该模型构成了phox2b-Parms的强度，该模型繁多了。
植物启动子的鉴定、特性及其在基因调控中的作用
摘要：克服作物疾病或非生物胁迫的策略之一是使用改良品种。遗传改良可以通过不同的方法实现，包括常规育种、诱发突变、遗传转化或基因编辑。基因功能和通过启动子调节的表达对于转基因作物改善特定性状是必不可少的。启动子序列的多样性在转基因作物的产生中有所增加，因为它们可以导致以特定方式表达负责改良性状的基因。因此，启动子活性的表征对于生物技术作物的产生是必要的。这就是为什么一些分析集中于使用逆转录聚合酶链反应 (RT-PCR)、基因文库、克隆和测序等技术来识别和分离启动子。启动子分析涉及植物遗传转化方法，这是一种确定植物中启动子活性和基因功能的有效工具，有助于了解基因调控和植物发育。此外，对在基因调控中起基础作用的启动子的研究也非常重要。对转基因生物的调控和发育的研究使我们能够了解以时间、空间甚至受控的方式引导基因表达的好处，证实了发现和开发的启动子种类繁多。因此，启动子是生物技术过程中确保基因正确表达的重要工具。本综述重点介绍了各种类型的启动子及其在转基因作物生成中的功能。
烟熏本米亚纳的完整基因组组装揭示了centromeres的遗传和表观遗传景观
Nicotiana Benthamiana是一种在植物生物学和生物技术中广泛采用的模型生物。自2012年最初发行以来，其基因组研究已落后。为了进一步提高其实用性，我们生成和相位的同种异体二磷酸n. benthamiana的完整的2.85 GB基因组组装，所有19个centromeres和38个端粒完全分析。我们发现，尽管甲酸溶剂粒粒子被TY3/GYPSY逆转录座子广泛主导，但基于卫星的centromeres在N. Benthamiana中令人惊讶的是，在N. Benthamiana中，有11个Cendromeres中有11个由超级范围层面卫星阵列展出。有趣的是，富含卫星的和无卫星的丝粒被独特的吉普赛逆转录子广泛入侵，其中CENH3蛋白更优选地占据了CENH3蛋白，这表明它们在中心仪功能中至关重要。我们证明rDNA是丝粒卫星的主要起源，线粒体DNA可以用作Centromere的核心成分。亚基因组分析表明，卫星阵列的出现可能会在多倍体化后基因组休克期间驱动着丝粒的形成和成熟。总的来说，我们提出了本氏菌Centromeres通过Neocentromere的形成，卫星扩张，逆转录转座子富集和mtDNA整合而发展。