事件摘要确定基因功能是主要生物能源作物高粱 (L.) Moench 的一个重要目标,特别是与其显著的非生物胁迫耐受性相关的基因。然而,对与这些性状相关的基因的详细分子理解有限。我们对高粱进行的深入转录组研究表明了这一点,研究表明其近 50% 的转录组尚未注释。在本报告中,我们描述了转化高粱所需的全套工具,以便验证和注释基因。我们首先努力修改一种转化方法,该方法使用形态发生基因 Baby Boom 和 Wuschel2(胚珠发育蛋白 2)来加快转化速度并扩大适宜的基因型。根据我们的经验,转化不含形态发生基因的 RTx430 需要约 18 到 21 周,而使用含有形态发生基因的方法生成 T 0 植物则需要约 10 到 12 周。利用形态发生基因还可以转化几种以前未转化或历史上难以转化的高粱基因型,即快速循环 SC187、保绿 BTx642、BTx623 和甜高粱 Ramada。为了通过工程验证候选基因,同时引入形态发生基因,开发了一种称为利他转化的共转化策略。为了完成对目标基因(八氢番茄红素去饱和酶)的编辑,我们创建了新的构建体,其中也包括形态发生基因。为了能够全面表征转化植物,我们采用了技术来确定高通量水平的拷贝数和事件的独立性。通过这些努力,我们创建了一条从农杆菌感染到高通量分子基因分型的完整途径,可用于确定基因功能并加快这种广泛种植的生物能源作物植物的基础遗传研究。