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接下来，使用倾斜的照明荧光显微镜（注5），我们观察到单个分子水平的DNA滴内荧光修饰的DNA结合蛋白的运动（图1B）。通过仅修饰要观察的DNA结合蛋白，可以在单分子水平上观察到。测量结果表明，所有四种类型的DNA结合蛋白在DNA液滴中具有快速，较慢的运动模式。我们还发现，液滴中较高的DNA浓度或增加蛋白质DNA结合位点的数量会导致移动模式较慢的比例增加。在慢速行进模式下，蛋白质可能使用多个DNA结合位点来结合DNA中的多个位置，同时读取多个DNA序列以搜索目标（图1C）。此外，在快速转移模式下，蛋白质会瞬时与DNA结合并解离，从而通过快速移动在液滴中来搜索遥远的目标序列。因此，已经揭示了DNA结合蛋白可以使用这两种模式来实现由液 - 液相分离形成的DNA液滴中有效靶向搜索。
Tohoku University
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