摘要 Argonaute (Ago) 蛋白是存在于真核生物和原核生物中的保守可编程核酸酶,可防御移动遗传元件。几乎所有已表征的 pAgo 都倾向于切割 DNA 靶标。本文,我们描述了一种来自 Verrucomicrobia 细菌的新型 pAgo (VbAgo),它可以在 37°C 下特异性地切割 RNA 靶标而不是 DNA 靶标,并可作为具有突出催化能力的多重周转酶发挥作用。VbAgo 利用 DNA 向导 (gDNA) 在规范切割位点切割 RNA 靶标。同时,在低浓度 NaCl 下切割活性显著增强。此外,VbAgo 对 gDNA 和 RNA 靶标之间的错配表现出较弱的容忍度,位置 11 至 12 的单核苷酸错配和位置 3 至 15 的双核苷酸错配会显著降低靶标切割。此外,VbAgo 可以在 37°C 下有效切割高度结构化的 RNA 靶标。VbAgo 的这些特性拓宽了我们对 Ago 蛋白的理解,并扩展了基于 pAgo 的 RNA 操作工具箱。
主要关键词