在37°C。 孵育30分钟后,将细胞用冰冷的PBS洗涤三次,以停止肽样品的内在化。 要观察新设计的纳米颗粒的线粒体靶向能力,将细胞与mito-tracker(绿色; 1 µm)进一步孵育20分钟,并用冰冷的PBS将三分之一洗涤,以观察与线粒体的样品共定位。 此外,对于核染色研究,将相同的细胞用Hoechst-33258处理,再孵育20分钟,然后用PBS洗涤三次。 接下来,使用caspase-3活性染色试剂盒(Solarbio®Co.,Ltd。北京,中国)评估caspase-3的活性。 将细胞用5 µM CASP-3试剂盒(AC-DEVD-PNA)染色30分钟,用冰冷的PBS洗涤两次。 此测定基于的检测在37°C。孵育30分钟后,将细胞用冰冷的PBS洗涤三次,以停止肽样品的内在化。要观察新设计的纳米颗粒的线粒体靶向能力,将细胞与mito-tracker(绿色; 1 µm)进一步孵育20分钟,并用冰冷的PBS将三分之一洗涤,以观察与线粒体的样品共定位。此外,对于核染色研究,将相同的细胞用Hoechst-33258处理,再孵育20分钟,然后用PBS洗涤三次。接下来,使用caspase-3活性染色试剂盒(Solarbio®Co.,Ltd。北京,中国)评估caspase-3的活性。将细胞用5 µM CASP-3试剂盒(AC-DEVD-PNA)染色30分钟,用冰冷的PBS洗涤两次。此测定基于