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摘要：植物根附近的土壤环境称为根际，是各种微生物的家园，可以显着影响附近植物的生理学。根际中的微生物可以提供营养，分泌信号传导化合物并抑制病原体。如果可以在这些非模型微生物中实施方法，则可以用合成生物学来操纵这些过程，以增强用于食品，能源或环境修复的农作物的农业表现。驯化非模型生物的常见第一步是开发一组基因工程工具，称为合成生物学工具箱。工具箱包括转换协议，复制向量，基因组工程（例如CRISPR/CAS9），组成型和诱导启动子系统以及其他基因表达控制元素。这项工作验证了三种固定氮的土壤细菌中的合成生物学工具箱：Azotobacter vinelandii，Stutzerimonas stutzeri（Pseudomonas stutzeri）和一个新的klebsiella kelellable variicola。所有三种生物都可以适合转化和报告蛋白的表达，每个生物都可以使用几种功能性诱导系统。S。Stutzeri和K. variicola显示出更可靠的基于质粒的表达，从而成功地重新组合了无疤痕缺失和插入。使用这些工具，我们产生了具有诱导氮酶活性的突变体，并引入了异源基因，以产生具有相关生物学活性的植醇产物。关键字：重18zotrophs，CRISPR，CAS9，合成生物学工具箱，基因组编辑，氮酶■简介
合成生物学工具箱用于氮固定土壤微生物
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