机构名称:
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摘要一种方法被描述为使用T7 RNA聚合酶和包含T7启动子的合成DNA的模板合成定义长度和序列的小RNA。仅在-17至+1启动子区域中配对的部分单链模板在转录中与线性质粒DNA一样活跃。径向转录本以独特的可预测位置启动,但在3'末端可能或多或少具有一个核苷酸。除了全长产物外,反应还产生了大量较小的寡核苷核苷酸,范围为2至6个核苷酸,这似乎是流产性起始事件的结果。启动子的+1至+6区域中的变体以降低的效率转录,但增加了可以制造的RNA的种类。转录反应条件已被优化,以允许合成毫克量的几乎所有RNA的长度。