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过程如下:在体外转录GRNA。cas9和grnas微注射到C57BL/6JGPT小鼠的受精卵中。受精卵被移植以获得通过PCR和靶标扩增子测序确认的阳性F0小鼠。通过与C57BL/6JGPT小鼠配对阳性F0产生小鼠获得稳定的F1生成小鼠菌株,并通过PCR和靶向Agplicon测序对所需的突变等位基因进行确认。

TDG CAS9-CKO策略

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