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与PMEI或SACI（AOX启动子）或AVRII（GAP启动子）线性化10-20 µg表达载体。限制位点不应存在于表达的基因中。乙醇促进限制消化以浓缩DNA。用5-10 µg线性化的质粒转化了电竞争性的皮基亚细胞。加入0.5 x YPD肉汤，用0.5m的山梨糖醇。在摇动或滚动孵化器中将转化后的细胞孵育1小时。用1M山梨糖醇和1 mg/ml Zeocin扩散50-200 µL的外生长细胞到YPD琼脂上。在30℃下孵化，直到2-3天内出现菌落。
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