摘要:由黑穗病菌(Ustilaginoidea virens)引起的水稻稻曲病是世界范围内最具破坏性的水稻病害之一,它导致水稻品质和产量的严重下降。作为一种空气传播的真菌病害,水稻稻曲病的早期诊断、监测其流行和病原体的分布对于控制感染尤为重要。在本研究中,开发了一种用于U. virens检测和定量的定量环介导等温扩增(q-LAMP)方法。与定量实时PCR(q-PCR)方法相比,该方法具有更高的灵敏度和效率。所使用的UV-2组物种特异性引物是根据U. virens ustiloxins生物合成基因(NCBI登录号:BR001221.1)的独特序列设计的。q-LAMP检测方法能够在60分钟内检测到6.4孢子/mL的浓度,最佳反应温度为63.4 ◦ C。此外,当纸带上只有 9 个孢子时,q-LAMP 方法甚至可以实现准确的定量检测。建立了 U. virens 检测和定量的标准曲线线性化方程 y = − 0.2866x + 13.829(x 为扩增时间,孢子数= 10 0.65y)。在田间检测应用中,该 q-LAMP 方法比传统观察方法更准确、更灵敏。总之,本研究建立了一种强大而简便的 U. virens 监测工具,为水稻稻曲病的预测预报和管理提供了宝贵的技术支持,也为精准施用杀菌剂提供了理论依据。
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