1。简短离心管,包含siRNA,以确保在管子的底部收集siRNA颗粒。2。使用表1。a中列出的所需量的所需的最终浓度重悬于无RNase 1X siRNA缓冲液中(请参见下面的注释)。例如:对于10 nmol的siRNA和20 µm库存浓度,加入500 µl 1x siRNA缓冲液。3。移液器上下溶液上下3-5次,避免引入气泡并牢固密封管(或多孔板)。4。在室温下将溶液放在轨道搅拌机/振动器上30分钟。5。简短离心管,包含siRNA,以确保将溶液收集在管子底部。6。使用260 nm处的紫外分光光度法验证siRNA的浓度。对于siRNA,1 µm = 13.3 ng/µl。对于microRNA模拟,1 µm = 14.1 ng/µl和microRNA发夹抑制剂,1 µm = 18.5 ng/µl请参阅FAQ,有关其他信息。7。RNA可以立即使用,或将等分等分为较小的体积以限制冻融周期的数量。重悬于的siRNA应将其存储在-20°C中,以手动除霜或非周期冰柜。在4°C下存储最多可容纳6周。
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