1。收集了三只小鼠的脾脏。2。将一个脾脏切成四个相等的碎片,浸入三种冷冻保存介质(Bambanker™,Cellbanker2和Stem -Cellbanker GMP级)中的每一个中的1 mL中,并存储在-80°C下10天。3。在37°C的水浴中解冻后,将脾样品浸入RPMI 1640中,含有约10 ml 10%的FBS和1%青霉素 - 链霉菌素。4。将样品离心,并丢弃上清液。5。脾脏,然后分离出细胞。6。rbcs在ACK裂解缓冲液中进行了血液,并重悬于PBS中。7。使用TC20细胞计数器(Bio-Rad)确定细胞计数和生存力。使用TC20细胞计数器(Bio-Rad)确定细胞计数和生存力。