酶工程是一个革命性的领域,它利用生物催化剂的潜力转化和优化工业过程,药品生产以及其他各种应用。酶,自然的分子机器,在催化生化反应中起着至关重要的作用,并且它们通过遗传和生化技术的操纵开辟了科学和技术领域的新边界。
图2涉及蓝细菌原代代谢的调节实体和产物。绿色表明各个调节剂在相关途径中的激活作用,红色表示相关途径的抑制作用。缩写:2-og:2-oxoglutarate; 2-PG:2-磷酸甘油酸; 3-PG:3-磷酸甘油酸; AA:氨基酸; BCAA:分支链氨基酸; C-DI-AMP:环状二腺苷磷酸盐; CA:碳酸酐酶;营地:环状腺苷磷酸盐; CCM:CO 2浓缩机制; CM:细胞膜; E4P:4-磷酸红细胞; FAS:脂肪酸合成; GS-GOGAT:谷氨酰胺合成酶 - 谷氨酰胺 - 氧甲酸 - 氨基转移酶周期; PEP:磷酸烯醇丙酮酸; PS:光系统; pyr:丙酮酸; rubp:核糖1,5-双磷酸盐; TM:类囊体膜。
摘要:氧与氧气消耗量增加的有限扩散导致大多数固体恶性肿瘤的慢性缺氧。已知这种氧气的稀缺性会诱导辐射势并导致免疫抑制的微环境。碳酸酐酶IX(CAIX)是一种酶,充当低氧细胞中酸性输出的催化剂,是慢性缺氧的内源性生物标志物。这项研究的目的是开发一种放射标记的抗体,该抗体识别出鼠类caix可视化慢性肿瘤模型中的慢性缺氧,并研究这些低氧区域中的免疫细胞群体。将一种抗MCACIS抗体(MSC3)偶联到二乙基三环乙酸乙酸(DTPA),并用依赖二醇标记为111(111英寸)。使用流式细胞仪确定鼠肿瘤细胞上的CAIX表达,并在竞争性结合测定中分析了[111 in] In-MSC3的体外亲和力。进行了体内生物分布研究,以确定体内放射性分布。CAIX +肿瘤分数通过MCAIX微光谱/CT确定,并使用免疫组织化学和自身自显影分析肿瘤微环境。我们表明,[111 in] In-MSC3在体外与表达Caix(Caix +)鼠细胞结合,并在体内积聚在Caix +地区。我们优化了[111 in] In-MSC3用于临床前成像的使用,以便可以将其应用于合成小鼠模型中,并表明我们可以通过Vivo McAix Micropect/CT进行定量区分具有不同CAIX +分数的肿瘤模型。对肿瘤微环境的分析确定这些Caix +区域被免疫细胞浸润较少。这些数据共同表明,McAix Microspect/CT是一种敏感技术,可视化缺氧的Caix +肿瘤区域,在合成小鼠模型中表现出降低免疫细胞的浸润。将来,该技术可能会在针对缺氧或减少缺氧治疗之前或期间可视化CAIX表达。因此,它将有助于优化翻译相关的合成小鼠肿瘤模型中的免疫和放射疗法功效。关键词:碳酸酐酶IX,缺氧,动物成像,免疫学,肿瘤微环境■简介
动力学是对反应速率的研究。 Study of enzyme kinetics is useful for measuring concentration of an enzyme in a mixture (by its catalytic activity), its purity (specific activity), measurement of the catalytic efficiency and/or the specificity of an enzyme, comparison of different forms of the same enzyme in different tissues or organisms, effects of inhibitors (which can give information about catalytic mechanism, structure of active site, potential治疗剂...)通过Michaelis-Menten方程来描述许多酶的速度对[底物]的依赖性。动力学参数:
a. [S] = K m b. [S] >> K m c. [S] << K m 7. 数据收集和处理 a. Lineweaver-Burk;双倒数;1/v 0 vs. 1/[S] b. Eadie-Hofstee;v 0 vs. v 0 /[S] c. Hanes-Woolf;[S]/v 0 vs. 1/[S] 8. 抑制 a. 不可逆:蛋白质修饰 b. 可逆 A. 竞争性;与底物相同;K m 受 (1 + [ I ]/ KI ) = a 的影响 B. 非竞争性;仅与 ES 结合;K m 和 V max 受到相反的影响 C. 非竞争性;与 E 和 ES 同时结合(混合、不平等结合);V max 受到影响 D. 如果 I 与 E 的结合方式与与 ES 的结合方式不同,则为混合抑制
以 3,5-双(三氟甲基)苯并肼 (1) 和各种取代的异硫氰酸酯为原料,合成了一系列新型氨基硫脲衍生物 (2a-d)。通过分析和光谱 (IR、1 H-NMR 和元素分析) 方法确定了新型化合物的结构。进行了计算机模拟研究,以确定和评估化合物的潜在抗癌活性。靶向药物设计对于癌症治疗至关重要,因为它可以提高选择性,从而减少抗癌药物的副作用。计算机辅助药物设计技术使我们能够设计和开发靶向的、因此具有选择性的治疗药物。我们在药物设计过程中受益于该技术,并将我们的靶标选定为 ATP 依赖性酶拓扑异构酶 II (Topo II)、表皮生长因子受体 (EGFR) 酪氨酸激酶结构域、碳酸酐酶 IX 和微管蛋白-秋水仙碱:stathmin 样结构域复合物,这些复合物因其生化和生理活性在癌症发展过程中发挥重要作用。根据计算机研究的结果,标题化合物显示出显著的潜在活性,具有成为多靶点药物的资格,可以同时作用和打击癌症化疗的几个主要靶点。
这是有关酶和酶抑制剂及其在医学和诊断中的应用的第一期的第一部分。第一篇论文着重于在需要长时间存储蛋白质的情况下维持MBCOMT的稳定性。膜结合的儿茶酚 - 甲基转移酶(MBCOMT)负责儿茶酚神经素 - 米特脱位的主要途径。该酶与几种类型的人类痴呆有关,新的,有效的无毒抑制剂已开发用于帕金森氏病治疗。,这种酶的不稳定性代表了新药开发的主要障碍,因为它倾向于迅速失去其生物学活性。离子液体可以帮助保持蛋白质稳定性和折叠,并由于其多种离子组合而预防蛋白质聚集。在酶缓冲液中添加添加剂,例如半胱氨酸,甘油和海藻糖,在最小化MBCOMT损伤并增强其稳定性方面显示出令人鼓舞的结果。结果表明,作者使用的缓冲液不仅导致HMBComt活性维持高达32.4 h,因此可以在-80℃下储存,而且与原始水平相比,生物学活性在-80℃下的储存量最高约40%[1]。第二篇论文的目的是在需要长时间存储蛋白质的情况下评估HMBCOMT的稳定性。作者测试了几个健康对照样品以验证测定法,然后研究了诊断出患有白内障,青光眼,过敏,干眼和叶博天腺功能障碍的患者的20个撕裂样本。获得的结果证实了ABMAS检验的可靠性,以量化人撕裂样品中MMP-9浓度的定量。因此,作者得出的结论是,生物标志物检测技术的使用对于评估预后和使眼科医生的工作更加容易,从而使患者健康的改善更大[2]也是有利的[2]。第三篇论文探讨了mpelanin浓度的激素1(MCHR1)拮抗剂的发展,这对于治疗肥胖症很有用。考虑到其结合位点类似于人类(HERG)通道的事实,并且由于HERG引起的心脏毒性,基于机器学习的预测模型在临床发育中开发的大多数药物在临床发展中失败了,这对于克服这些困难而言是有用的。考虑到这一点,作者试图使用基于DNN的机器学习模型发现新的MCHR1拮抗剂,而没有心脏毒性,并通过分析基因表达来识别新的适应症。结果,作者确定了具有心脏毒性的KRX-104130 MCHR1拮抗剂。此外,发现通过使用基于转录组的药物重新定位方法,可以识别该拮抗剂的新指示。因此,作者表明KRX-104130增加了低密度脂蛋白受体(LDLR)的表达,这是胆固醇水平降低的原因。此外,有人提到,这种拮抗剂通过降低肝脂质积累的程度,肝脏