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控制糖基转移酶活性：抑制和酶工程
3.09.1 简介 204 3.09.1.1 Leloir 与非 Leloir GT 及其供体底物 204 3.09.1.2 基于序列的 CAZy 家族和 GT 的结构分类 205 3.09.1.3 GT 的机制 205 3.09.1.3.1 反转 GT 机制 205 3.09.1.3.2 保留 GT 机制 206 3.09.2 GT 活性的抑制 208 3.09.2.1 GT 抑制剂的类型 208 3.09.2.1.1 GT 底物类似物和过渡态类似物 208 3.09.2.1.2 GT 的糖基化抑制剂 211 3.09.2.1.3 天然产物作为 GT 抑制剂 212 3.09.2.1.4 结构多样的合成小分子作为 GT 抑制剂 214 3.09.2.2 识别 GT 抑制剂的高通量筛选策略 215 3.09.2.2.1 通过核苷酸释放测量 GT 活性的偶联酶测定 215 3.09.2.2.2 基于碳水化合物微阵列的 GT 测定 216 3.09.2.2.3 基于荧光偏振的 GT 测定 217 3.09.2.2.4 使用荧光团标记的糖供体直接荧光测定 GT 活性 219 3.09.2.2.5 糖苷酶依赖性荧光偶联 GT 测定 219 3.09.3 GT 活性工程 221 3.09.3.1 使用合理的蛋白质设计修改 GT 活性 221 3.09.3.1.1 GT 的定向诱变 221 3.09.3.1.2 域交换生成 GT 嵌合体 222 3.09.3.2 高通量筛选策略及其在发现和设计 GT 活性中的应用 225 3.09.3.2.1 用于天然产物 GT 定向进化的基于平板的荧光猝灭策略 225 3.09.3.2.2 通过 FACS 进行细胞内荧光捕获以筛选 GT 活性 225 3.09.3.2.3 在基于平板和颗粒的体外试验以及基于 FACS 的体内试验中利用聚糖结合蛋白筛选 GT 活性 227 3.09.4 结论 228 参考文献 228
糖基化的纳米颗粒用于癌症靶向药物的递送
纳米颗粒（NPS）是可以携带靶向癌症分子和药物的新型平台，以避免由于标准化疗治疗中非专业药物递送而引起的严重副作用。癌细胞的特征是异常的膜，代谢变化，凝集素受体的存在，葡萄糖转运蛋白（GLUT）过表达以及细胞表面上编程死亡的免疫受体的糖基化。这些特征导致了癌症治疗的几种策略的发展，包括大量碳水化合物模型的NP，这些NP已成为细胞选择性药物输送系统，因为它们会增加纳米粒子 - 细胞相互作用和对携带药物的吸收。当前，NP糖基化的潜力增强了携带的治疗抗肿瘤剂的安全性和效率，并且已广泛认可，并且在该领域中积累了许多信息。本综述旨在重点介绍NP稳定，降低毒性和药代动力学改善的最新进展以及NP糖基化的有希望的潜力，从描述的用于癌症治疗的药物输送系统的分子机制的角度来看。从临床上的概念验证到诊所的治疗价值，糖基化NP所带来的挑战和机会，重点是它们在纳米果的开发中的适用性。
新型糖基化酶碱基编辑器(GBE
Anzalone, AV、Koblan, LW 和 Liu, DR (2020)。使用 CRISPR–Cas 核酸酶、碱基编辑器、转座酶和主要编辑器进行基因组编辑。《自然生物技术》，1-21。
文章评估糖基化的FLPA和SODB作为针对鸡弯曲杆菌的亚基疫苗
摘要：弯曲杆菌空肠是全球人类胃炎的主要原因，并且处理或消费受污染的家禽肉是感染的关键来源。C.空肠蛋白FLPA和SODB和含有J. jejuni n -Glycan的糖缀合物分别据报道是鸡的部分保护性疫苗。在这项研究中，由蛋白质聚糖偶联技术产生的两种新型糖蛋白 - G-FLPA和G-SODB（分别具有两个和三个N-糖基化位点） - 通过相对于其Unglycosylsy-c. jejuni菌株M1的鸡肉菌菌株对鸡肉的肠道结构进行了评估。进行了两项相同设计的独立试验，以10 7菌落形成单位（CFU）或最低挑战剂量为10 2 CFU的Jejuni M1的高挑战剂量。在两项试验中都检测到抗原特异性血清Igy，但未观察到Jejuni M1的盲肠定植降低，并且疫苗抗原的糖基化对结果没有影响。我们的数据突出了在空肠梭菌疫苗接种试验结果中的不一致，该试验可能会反映抗原，挑战菌株，疫苗给药，辅助和鸡系特异性的差异。通过增加糖基化水平或使用高度免疫原性蛋白载体来改善糖结轭疫苗可以改善其效率。通过增加糖基化水平或使用高度免疫原性蛋白载体来改善糖结轭疫苗可以改善其效率。
ab273298 晚期糖基化终产物 (AGEs) 检测试剂盒
晚期糖基化终产物 (AGEs) 活性检测试剂盒 (ab273298) 可用于半定量估计生物体液中的荧光 AGEs 水平。该检测基于特征荧光 (Ex/Em= 360/460 nm)，几乎所有 AGEs 都具有这一特征。检测缓冲液的专有成分可明确区分 AGEs 和非氧化蛋白质。一步法检测使用氧化牛血清白蛋白 (AGE-BSA) 作为阳性对照。BSA 用作背景对照，其在检测条件下的荧光定义为任意单位 (AU 或 RFU 样品 / RFU 背景) 中的 1 个相对荧光强度。
点击化学实现了糖基合成酶的定向进化，用于定制聚糖的合成
图 1. SPAAC 与 DBCO-PEG4-Fluor545 反应过程中形成的有机（β-D-葡萄吡喃叠氮化物）与无机（叠氮化钠）叠氮化物的三唑产物表现出不同的相对荧光强度。A) DBCO-PEG4-Fluor 545 与叠氮化物的点击化学或 SPAAC 反应产生的三唑产物取决于与 DBCO 部分反应的有机叠氮化物与无机叠氮化物的类型。这里显示了在 37°C 下 1X PBS 缓冲液（pH 7.4）中 DBCO-PEG4-Fluor 545 (200 µM) 与叠氮化钠或 β-D-葡萄吡喃叠氮化物 (400 µM) 底物发生 SPAAC 反应期间观察到的三唑部分特定吸光度 (B) 和整体产物荧光 (C) 的相对变化。有趣的是，虽然吸光度没有差异，但有机叠氮化物和无机叠氮化物的 SPAAC 反应产物的最终荧光读数明显不同。请注意，吸光度是在 309 nm 处测量的，而荧光是在 550 nm 激发和 590 nm 发射（570 nm 截止）处测量的。灰色方块和红色圆圈分别对应于在指定时间点收集的无机叠氮化物和有机叠氮化物的实验数据。线
UDP-半乳糖 - 乳糖酰胺半乳糖基转移酶在发育过程中的大鼠脑髓素亚菌群中
在发育过程中，大鼠脑髓磷脂亚菌群中描述了含有含有神经酰胺半乳糖基转移酶的酶UDP-半乳糖糖羟基脂肪酸的定位和活性。其他脂质合成酶，例如脑硫磺硫酸光转移酶，UDP-葡萄糖 - 葡萄糖 - 陶瓷葡萄糖基转移酶和CDP-胆碱-1,2-二酰基甘油胆碱磷酸酶磷酸酶也已在肌蛋白亚纤维上和微晶片中进行比较。纯化的髓磷脂被异icnic蔗糖密度梯度离心分离。四个髓磷脂亚馏分分别在0.55 m-（浅绿色蛋白级分），0.75 m-（重膜蛋白级分）和0.85 m-核（膜馏分）和一个颗粒中，分离并纯化。在所有年龄段，在重肌蛋白馏分中发现了总髓磷脂蛋白的70-75％，而在轻膜林馏分中恢复了2-5％的蛋白质，而在膜分数中约为7-12％。大多数半乳糖基转移酶与重膜蛋白和膜分数有关。所研究的其他脂质合成酶似乎不与纯化的髓磷脂或髓磷脂亚菌群相关，而是在微体积 - 膜分数中富集。在发育过程中，当动物大约20天大然后下降时，微粒体半乳糖基转移酶的特异活性达到了最大值。相比之下，在重膜蛋白和膜级分中，半乳糖基转移酶的特异活性比16天大的动物中微粒体膜高3-4倍。酶在重绿色蛋白级分中的特定活性随着年龄的增长而急剧下降。对各个年龄段的重髓蛋白和髓磷脂亚折原的化学和酶学分析表明，膜级分所含的蛋白质与脂质有关，而不是重膜蛋白分数。与胆固醇相比，膜级分在磷脂中也富集，并含有2'：3'-循环核苷酸3'-磷酸水解酶，而与重蛋白质和轻质蛋白质级别相比。膜馏分缺乏髓磷脂碱性蛋白和蛋白质蛋白，并富含高分子量蛋白。在髓鞘化刚刚开始的时候，半乳糖基转移酶在重膜蛋白和膜级分中的特定定位表明它可能在髓鞘化过程中起作用。