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World File Search SystemAgrobacterium
纳米比亚大学
3. 在制造转基因细菌的过程中会发生哪些事件的顺序 A. 提取所需基因和 连接基因和质粒 将质粒插入细菌细胞 转化的细菌细胞的生长 B. 转化的细菌的生长 将质粒插入细菌 提取所需基因 C. 将质粒插入细菌 转化的细菌细胞的生长 提取所需基因 D. 将质粒提取入细菌 提取细菌细胞的生长 4. 什么酶在限制片段之间形成共价键？ A. DNA 引物酶 B. DNA 解旋酶 C. DNA 连接酶 D. DNA 聚合酶 5. 克隆载体的典型特征是什么？ A. 在某些条件下生长时，细菌细胞没有它就无法存活。 B. 它含有允许插入外来 DNA 片段的限制位点。 C. 它可以在细菌细胞中复制。 D. 以上所有。 6. 为了将人类基因插入质粒，两者必须 A. 编码相同的基因产物。 B. 被相同的限制性酶切割。 C. 源自同一类型的细胞。 D. 具有相同的序列 7. 农杆菌在转基因植物生产中的作用是什么？ A. 农杆菌基因被插入植物 DNA 中，使植物具有不同的特性。 B. 转基因植物对害虫农杆菌具有抗性。农杆菌被用作将基因转移到植物细胞中的载体。 D. 植物基因被整合到农杆菌基因组中
摘要。 Ruzyati M，Sisharmini A，Apriana A，Santoso TJ，Purwanto E，Samanhudi，Yunus A. 2022。
摘要。Ruzyati M，Sisharmini A，Apriana A，Santoso TJ，Purwanto E，Samanhudi，Yunus A.2022。CRISPR/CAS9_GRNA-OSCKX2模块盒的构建及其引入米CV。Mentik Wangi由农杆菌Tumefaciens介导。生物多样性23：2679-2689。Mentik Wangi是一种来自热带Japonica群体的芳香稻米品种，其姿势高且生产率低。高大的植物姿势使Mentik Wangi大米容易容易住宿，从而导致产量损失。因此，仍然需要提高Mentik Wangi的植物高度和生产力。SD-1（OSGA20OX-2）和CKX2基因负责半矮人特征和高生产率。这项研究旨在构建一个带有OSCKX2基因的GRNA的CRISPR/CAS9盒式模块，并将这种结构引入由Tumefaciens vector lba4404介导的Mentik Wangi水稻。也在先前对Mentik Wangi大米的研究中构建的CRISPR/CAS9_GRNA-GA20OX-CASTETE质粒的引入。结果表明，CRISPR/CAS9_GRNA-CKX2盒式模块已成功地使用Golden Gate Cloning方法构建。将CRISPR/CAS9_GRNA-CKX2和CRISPR/CAS9_GRNA-GA20OX-2盒式模块引入Mentik Wangi Rice，导致了30种通过Hygromycin选择的推定转化线。PCR分析表明，从30条变换线中，15条线对抗霉素抗性基因呈阳性。必须进行进一步的分析，以确定OSCKX2和GA20OX-2靶基因中诱变的发生。
一种改良的农杆菌介导的针对两种卵菌病原体的转化方法
卵菌是一类丝状微生物，其中包括对粮食安全和自然生态系统的最大威胁之一。然而，这些生物的致病机制和发育的大部分分子基础仍有待了解，这主要是由于缺乏有效的基因操作方法。在本研究中，我们开发了针对两种重要的卵菌物种 Phytophthora infestans 和 Plasmopara viticola 的改良转化方法，这两种物种给农业生产带来了毁灭性的损害。作为研究的一部分，我们通过在农杆菌中原核表达 AtVIP1（VirE2 相互作用蛋白 1）建立了一种改良的农杆菌介导转化 (AMT) 方法，AtVIP1 是拟南芥的一个 bZIP 基因，是 AMT 所必需的，但在卵菌基因组中不存在。使用新方法，我们提高了两种 P . infestans 菌株的转化效率。我们进一步使用改良的 AMT 方法获得了 P . viticola 的阳性 GFP 转化子。通过将此方法与 CRISPR/Cas12a 基因组编辑系统相结合，我们成功进行定点诱变，并在两个马铃薯致病疫霉基因中产生了功能丧失的突变。我们编辑了一个 MADS-box 转录因子编码基因，发现 MADS-box 的纯合突变导致孢子形成不良和毒力显著降低。同时，我们针对马铃薯致病疫霉中单拷贝无毒力效应基因 Avr8 进行了定点突变，编辑后的转化子对携带同源抗性基因 R8 的马铃薯具有毒性，这表明 Avr8 的缺失导致病原体成功逃避宿主的免疫反应。总之，本研究报告了一种改进的遗传转化和基因组编辑系统，为加速卵菌和其他微生物的分子遗传学研究提供了一种潜在的工具。
通过康普茶微生物合成的细菌纤维素合成，培养基上具有可变成分的营养成分izabela betlej，krzysztof J. krajewski
通过康普茶微生物合成细菌纤维素在培养基上具有可变成分的养分成分Izabela betlej，Krzysztof J. Krajewski木材科学与木材保护系，木材技术学院，生命科学学院，科学科学摘要：细菌性纤维素纤维素合成，由knoboclocha micrororororgans of Nivients of Nivient of Nivient of Nivient of Nivient of Nivient of Animorororororerororerororerororormermismiss o an n a Indivients o and raimor of Animer of An I介绍。本文提出了评估各种蔗糖含量的影响的结果，以及康普茶微生物对合成效率和获得的细菌纤维素质量的生长培养基中各种氮化合物的存在。对获得的研究结果的分析表明，康普茶微生物合成纤维素合成的效率取决于生长培养基中可用的营养的数量和质量。关键词：细菌纤维素，康普茶，碳和氮源从化学的角度引入，细菌纤维素与植物纤维素相同，但是它具有比从植物组织中得出的纤维素更高的特征。首先，它的特征是高纯度，这是由于缺乏木质素和半纤维素，高结晶度，形成任何形状的易感性，高的吸湿性和非常高的机械强度以及高生物学兼容性[5,8,10]。这些功能保证了在各个行业使用细菌纤维素的绝佳机会。细菌纤维素已经成功地用于医学，作为敷料材料或外科植入物，作为生物传感器，以及食品，药房和造纸工业[7]。Fan等。Fan等。在造纸工业中，细菌纤维素主要用于漂白废纸，作为印刷缺陷的填充物[6]。在木工和包装行业中使用纤维素似乎也是潜在的。细菌纤维素是由细菌和酵母菌的大量微生物合成的。在纤维化微生物中，属于属的生物体：乙酰杆菌，动杆菌，achromobacter，achromobacter，agrobacterium，agrobacterium，psedomonas和sarcina [1]。这些微生物经常以企业化，生物膜的形式出现，通常被描述为“ Scoby”。尽管有许多独特的物理化学特征和非常有前途的应用观点，但在大规模上使用细菌纤维素会带来一些困难。这主要是由于生产成本仍然很高，生产率较低。高产量的合成产量不仅取决于培养方法，这与营养物质的可用性有关，还取决于微生物的动态相互作用。个体菌株的营养需求差异很大。Ramana和Singh [9]发现，乙型杆菌开发的最佳碳源，Nust4.1菌株，是葡萄糖，微生物和纤维素合成的生长进一步增加了，在存在硫酸钠的存在下，乙型甲基菌的生长，BRC菌株的生长，是乙醇，是乙醇的其他动态，是其他动态的。使用可变来源的碳和氮来对纤维素合成效率进行评估。[3]评估了底物上细菌纤维素的合成和质量，并增加了食品工业的废物。在这项工作中，尝试使用三种类型的培养基来评估通过包含的微生物菌株来评估细菌纤维素合成的效率，这些培养基的含量和氮源的可用性不同。
第A节研究方法（2024年修订）索引
植物组织培养技术，微繁殖，细胞，组织Andorgan培养，诱导和继发代谢产物的产生。基因工程中的酶，克隆载体，农杆菌介导的基因转移，转化体的表征，基因库，DNA测序，基因组学和蛋白质组学介绍，PCR和RTPCR技术。2。Bioinformatics Databases : Primary sequence databases (GenBank-NCBI, the nucleotide sequence database-EMBL, DNA sequence databank of Japan- DDBJ; Protein sequence and structure databases (PDB, SWISS-PROT and TrEMBL); Derived (Secondary) Databases of Sequences and Structure: Prosite, PRODOM, PRINTS, Pfam, BLOCK, SSOP, and CATH.酶数据库，生物多样性数据库。
芽再生的优化及农杆菌...
摘要：高效的植物转化和组织培养方法对于植物的遗传工程和先进的分子育种至关重要，但在栽培的八倍体草莓 (Fragaria × ananassa) 中，这两种方法都尚未得到很好的建立。在本研究中，针对两个基因不同的草莓品种 Sweet Sensation VR Florida 127 (FL127) 和 Florida Brilliance (FB) 建立并优化了一种芽再生方法。从温室生长的植物中获得的尖端、节点和叶柄的匍匐茎段被用作外植体，用于比较芽再生率。'FL127' 在优化条件下显示出最高的芽再生频率，而'FB' 在相同培养基类型中对较低浓度的 N6-苄基腺苷 (BA) (0.01 mg/L) 的反应最佳。 'FL127' 和 'FB' 中体细胞胚从匍匐茎尖 (RT) 向芽再生的平均转化频率分别为 42.8% 和 56.9%。利用这些优化的组织培养条件，进行农杆菌介导的 CRISPR/Cas9 基因编辑，以检查品种 FL127 中八氢番茄红素去饱和酶 FaPDS 的转化和靶基因编辑效率。总共 234 个外植体接种了含有 Cas9-FaPDS 的农杆菌，导致愈伤组织诱导效率为 80.3%，其中 13.3% 的再生植物表现出部分或完全的白化表型。编辑子代的扩增子测序表明，所有 FaPDS 同源拷贝的向导 RNA (gRNA) 靶位点或侧翼区域均发生了突变（替换、插入和缺失）。我们的研究结果为草莓功能基因组学研究和基因编辑指导的品种改良提供了有效的组织培养和转化方法。
棉花分生植体的直接种系转化，没有选择
没有可选标记的转基因植物的再生可以促进性状堆叠产品的开发和商业化。已经开发了各种策略来消除可选标记以生产无标记的转基因植物。最广泛使用的无标记方法可能是基于农杆菌的2 T-DNA策略，其中利率基因（GOI）和可选标记基因从独立的T-DNA中传递（Darbani等，2007）。可选标记基因在随后的几代中脱离了GOI。然而，由于T-DNA共转化的不确定和GOI和可选标记基因T-DNA之间的高率，该2 T-DNA系统的效率远小于传统的1 T-DNA系统。相比之下，没有选择转换使用带有GOI的单个T-DNA，因此消除了删除可选标记插入物的需要，并有可能提供可行的替代标记系统。在这项研究中，我们报告了通过无需使用选择性剂的种子分生植物的农杆菌接种种植的转基因棉植物的成功再生。通过GUS组织化学测定，鉴定出推定的转基因植物的再生。通过GUS表达通过花粉粒，未成熟胚胎和T1植物的分离来确定转基因向后代的种系传播。通过南部分析进一步确认了结果。在此无选择系统中，无标记转换频率与当前的分生组织转换系统相似（0.2％ - 0.7％）。讨论了进一步改进该系统的策略及其在改善棉花转化管道和开发无基因基因组编辑技术方面的意义。
个人简历 - 纯粹与应用科学学院
- 通过未成熟叶片外植体的体细胞胚胎发生，为肯尼亚木薯 (Manihot esculenta) 开发一种可重复的体外再生方案 - 为农杆菌定向转化肯尼亚木薯基因型开发一种可重复的方案 - 利用 RNA 干扰生成无氰肯尼亚木薯 - 优化实验模型，以在实验室动物模型中诱导肥胖、痴呆、癫痫和焦虑 - 成功指导了 29 名硕士生和 15 名博士生 - 在同行评审的期刊上发表了 53 篇论文 - 参加了科学会议 - 获得了研究补助金 - 参与和合作开发肯雅塔大学法医学文凭和研究生文凭课程 - 在该部门实施文凭和研究生文凭课程