目的:癌症组织特异性和核定靶向药物的递送是化学疗法递送的理想选择。但是,它仅在体外研究中才实现,这主要是由于体内效率低。在这项研究中,我们旨在建立一个有效的双靶向系统,该系统针对肝癌组织以及体内癌细胞的核。方法:我们首先合成TAT肽(TATP) - 近极硅纳米颗粒(MSN)复合物(TATP-MSN),并产生的脂质体携带肝癌特异性Aptamer TLS11A(TLS11A-LB)。然后,我们通过混合TLS11A-LB和DOX负载的TATP-MSN来生成药物TLS11A-LB@TATP-MSN/doxorubicin(dox)。在纳米颗粒的物理和化学表征后,在pH 5.0和7.4中评估了从这些制剂中释放DOX。此外,我们还在体外评估了H22细胞中该药物的核定位和细胞毒性,并使用含H22肿瘤的小鼠模型研究了体内纳米毒的肝癌靶向和抗肿瘤活性。结果:使用透射电子显微镜(TEM)证实TLS11A-LB@TATP-MSN/DOX及其对照被确认为纳米药物(<100 nm)。TLS11A-LB@TATP-MSN/DOX的DOX释放速率在pH 5.0时明显快得高于pH 7.4。TLS11A-LB@TATP-MSN/DOX有效地针对H22细胞的核,并以比对照组更高的效率释放DOX。此外,TLS11A-LB@TATP-MSN /DOX表现出轻微的细胞毒性,但不明显超过对照组。因此,它是治疗肝癌的有希望的纳米药物。体内研究表明,TLS11A-LB@TATP-MSN在BALB/C小鼠的右腋下中积聚在皮下H22肿瘤中,分别在静脉注射后48小时达到峰值水平,并证明TLS11A-LB@TATP-MSN/DOX组在tls-lb@taTP-MSN/DOX组效应时效应有效。结论:TLS11A-LB@TATP-MSN/DOX可以通过双重靶向肝癌组织和小鼠中癌细胞的核有效地将DOX传递到肝癌细胞的核。关键字:靶向药物,肝癌治疗,基于MSN的车辆,阿霉素,组织和核特异性靶向
迫切需要具有增强效力和特异性的新型抗病毒药物来治疗水痘带状疱疹病毒 (VZV) 和单纯疱疹病毒 (1 和 2) 感染。L-BHDU(β-L-1-[5-(E-2-溴乙烯基)-2-(羟甲基)-1,3-(二氧杂环戊烷-4-基)]尿嘧啶)在培养细胞和人源化 SCID 小鼠中对水痘带状疱疹病毒 (VZV) 具有高度活性。此外,L-BHDU 对 HSV1 也具有高度活性,对 HSV2 具有中等活性(EC 50 7 µM)。我们采用前药方法合成了带有双(新戊酰氧甲基)基团的单磷酸盐前药 POM-L-BHDU-MP,以提高其药理特性,同时保留抗病毒活性(VZV EC 50 0.04 µM;HSV1 EC 50 0.03 µM;CC 50 >100 µM)。在体内实验中,我们在皮肤器官培养物和小鼠中评估了 POM-L-BHDU-MP 对抗 VZV 和 HSV1 的作用,并研究了其药代动力学和分布特性。可可脂中的 POM-L-BHDU(0.2% 顶部)可防止 VZV 或 HSV1 扩散,并且对人体皮肤外植体无毒。在 NuSkin 小鼠模型中,POM-L-BHDU-MP 可减少经皮下和口服途径的 VZV 扩散(45、22.4、11.3 mg/kg)并且耐受性良好。在 BALB/c 小鼠皮肤侧腹模型中,POM-L-BHDU-MP(22.4 mg/kg 口服)减轻了 HSV1 引起的体重减轻,更多研究正在进行中。给小鼠口服或静脉注射 POM-L-BHDU-MP,然后用 LC-MS/MS 分析其血浆和器官。POM-L-BHDU-MP 迅速转化为 L-BHDU,口服生物利用度高。血浆中的 L-BHDU(22.5 mg/kg 口服)达到 C max 为 10 ± 2.5 µg/mL,T max 为 0.85 小时;半衰期为 5-6 小时。L-BHDU 分布在小鼠器官中,包括大脑和脑脊液。 L-BHDU 的磷酸化代谢物在未感染的小鼠中是痕量的,而 L-BHDU 的二磷酸盐和三磷酸盐形式在 VZV 感染的人类皮肤异种移植中为 30-50 µM,超过了 EC 90 。总体而言,POM-L-BHDU-MP 是 L-BHDU 的强效前药,是一种有前途的核苷酸类似物,可用于治疗 VZV 和 HSV1 感染。
迫切需要具有增强效力和特异性的新抗病毒药物来治疗水痘带状疱疹病毒(VZV)和单纯疱疹病毒(1&2)感染。l-bhdu(β-L-1- [5-(E-2-溴叶烯基)-2-(羟甲基)-1,3-(二恶英-4-基)] uracil在培养的细胞和人型scid小鼠中对Vericella Zoster病毒(VZV)具有高度活性。此外,L-BHDU对HSV1也具有很高的活性,并且对HSV2(EC 50 7 µM)表现出了中等活性。使用前药方法,我们将单磷酸前药POM-L-BHDU-MP与BIS(Pivaloyloxymethyl)组合成,以改善其药理性能,同时保留抗病毒活性(VZV EC 50 0.04 µM; HSV1 EC 50 0.03 µm; HSV1 EC 50 0.03 µm; CC 50> 100> 100> 100> 100> 100> 100 µm)。在体内,对皮肤器官培养物和小鼠的VZV和HSV1评估了POM-L-BHDU-MP,并研究了药代动力学和分布性能。pom-l-bhdu(顶部为0.2%)可以防止VZV或HSV1扩散,并且对人皮外植体无毒。在Nuskin小鼠模型中,POM-L-BHDU-MP通过皮下和口服路线(45、22.4、11.3 mg/kg)降低了VZV扩散,并且耐受性良好。在BALB/C小鼠皮肤侧面模型中,POM-L-BHDU-MP(22.4 mg/kg PO)减少了HSV1诱导的体重减轻,并且正在进行更多的研究。小鼠口服或静脉注射POM-L-BHDU-MP,并通过LC-MS/MS分析其血浆和器官。POM-L-BHDU-MP迅速转化为L-BHDU,口服生物利用度很高。l-BHDU(22.5 mg/kg PO)达到10±2.5 µg/ml的C最大为0.85 h;半衰期是5-6小时。 L-BHDU分布在小鼠器官中,包括大脑和脑脊液。L-BHDU的磷酸化代谢产物是未感染的小鼠的痕迹,而L-BHDU的Di-和三磷酸形式为30-50 µm,在VZV感染的人类皮肤异种移植物中,超过EC 90。总体而言,POM-L-BHDU-MP是L-BHDU的有效前药,这是一种可用于治疗VZV和HSV1感染的有前途的核苷酸类似物。
抽象背景癌症免疫疗法(包括免疫检查点抑制剂)仅对有限的癌症患者有效。因此,预计新型癌症免疫疗法的发展。在初步研究中,我们证明了四环素增强了T细胞反应。因此,我们在这里研究了四环素对人外周T细胞,鼠模型和非小细胞肺癌患者(NSCLC)患者的抗肿瘤T细胞反应的疗效,重点是T细胞中的信号途径。使用双特异性T细胞Engager(Bite)技术(咬合分析系统)评估外周和肺肿瘤浸润的人T细胞对肿瘤细胞的细胞毒性。与抗编织细胞死亡1(PD-1)抗体Nivolumab相比,使用咬合测定系统检查了健康供体血液和NSCLC患者肿瘤组织T细胞的影响。通过流式细胞仪,ELISA和QRT-PCR分析 T细胞信号分子。为了研究四环素的体内抗肿瘤作用,在存在或不存在抗小鼠CD8抑制剂的情况下,将四环素口服给植入鼠肿瘤细胞系的BALB/C小鼠。结果获得的结果表明,四环素随着颗粒酶B的上调增强了抗肿瘤T细胞毒性,并增加了人外周T细胞中干扰素-γ的分泌,而NSCLC患者的肺肿瘤组织则增强。在相同条件下用抗PD-1抗体处理的T细胞中未观察到这些变化。T-细胞信号传导的分析表明,CD4 +和CD8 + T细胞中的CD69被米诺环素上调。T细胞受体信号传导,ZAP70磷酸化和NUR77的下游也在T细胞激活后的早期阶段被米诺环素上调。在鼠肿瘤模型中,四环素的给药表现出抗肿瘤疗效,CD69的上调和肿瘤抗原特异性T细胞的增加。通过抗小鼠CD8抑制剂的给药取消了这些变化。结论是,四环素通过ZAP70信号传导增强了抗肿瘤T细胞免疫。这些结果将有助于新型癌症免疫疗法的发展。
促红细胞生成素生成肝细胞受体 A2 (EphA2) 是一种参与细胞间相互作用的受体酪氨酸激酶。已知它在各种肿瘤中过度表达,并且与不良预后有关。EphA2 已被提议作为治疗诊断应用的靶点。具有低纳摩尔亲和力的低分子量肽基支架已被证明是此类应用的理想选择。双环肽已成为此目的的传统肽的替代品,由于其受限性质,其亲和力可与抗体相媲美,并且与线性对应物相比具有高组织渗透性和更好的稳定性。本研究介绍了 BCY18469 的开发以及全面的体外和体内临床前评估,BCY18469 是一种新型的 EphA2 靶向双环肽放射治疗剂。方法:通过噬菌体展示鉴定 EphA2 靶向双环肽® 肽 BCY18469 并进行化学优化。 BCY18469 用 68 Ga、177 Lu 和 111 In 放射性标记。体外评估了该肽的物理化学性质、结合亲和力和内化以及特异性。分别使用 [ 68 Ga]Ga-BCY18469 和 [ 111 In]In-BCY18469 进行体内 PET/MR 和 SPECT/CT 成像研究,以及在 HT1080 和 PC-3 肿瘤携带 BALB/c nu/nu EphA2 过表达异种移植小鼠模型中注射后长达 24 小时的 [ 177 Lu]Lu-BCY18469 的生物分布。结果:靶向 EphA2 的双环肽 BCY18469 对人类和小鼠 EphA2 表现出高结合亲和力(分别为 1.9 和 3.8 nM)。 BCY18469 特异性结合并内化到表达 EphA2 的 HT1080 细胞中。成像研究显示早期时间点肿瘤富集程度高(PET/MRI 中 SUV 为 1.7 g/mL,1 小时后 SUV 为 1.2 g/mL,HT1080 异种移植),肿瘤造影剂早在 5 分钟后就已存在,并且肾脏介导清除。生物分布研究显示早期肿瘤摄取率高(1 小时后 19.5 ± 3.5 %ID/g,HT1080 异种移植),SPECT/CT 成像进一步证实了这些发现(1 小时后 5.7 ± 1.5 %ID/g,PC-3 异种移植)。结论:BCY18469 表现出高亲和力、对 EphA2 的特异性靶向性、良好的生物分布特性和通过肾脏途径清除。这些发现强调了双环肽在推进放射治疗诊断方法中潜在的重要作用,并鼓励进一步的转化研究。
在细胞的监督分类中优化特征提取和分类器的组合组合Xhoena polisi duro 1,2*,Arban UKA 2,Griselda alushllari 2,Albana Ndreu Halili 3,Dimitrios A. Karras A. Karras A. Karras 2,Nihal Engin vrana vrana 4 1 Informatics obs s. noli oblia,“ fan nori”,koria,koria,koria,korica,korica,korica,korka,korka,“ korcua”。 xpolisi@epoka.edu.al(X.P.D.)。2埃波卡大学计算机工程系,阿尔巴尼亚蒂拉纳市; auka@epoka.edu.al(a.u.)galushllari@epoka.edu.al(G.A。)dkarras@epoka.edu.al(d.a.k.)3西巴尔干大学医学系,阿尔巴尼亚提拉娜; albana.halili@wbu.edu.al(a.n.h。) 4法国斯特拉斯堡的Spartha Medical; evrana@sparthamedical.eu(N.E.V.) 摘要:医学领域的发展已经开放了在个性化患者层面进行分析的机会。 可以进行的重要分析之一是对工程材料的细胞反应,最合适的非侵入性方法是成像。 这些细胞的图像是未染色的Brightfield图像,因为在存在生物材料和流体的情况下,它们是从多参数微流体室获取的,这些室可能会随着时间的流逝而改变光路的长度,因为细胞的健康状态被监测。 这些实验条件导致具有独特照明,纹理和噪声频谱的图像数据集。 本研究通过将特征提取体系结构和机器学习分类器结合起来,探讨了监督细胞分类的优化,并重点介绍了生物材料风险评估中的应用。 1。 简介3西巴尔干大学医学系,阿尔巴尼亚提拉娜; albana.halili@wbu.edu.al(a.n.h。)4法国斯特拉斯堡的Spartha Medical; evrana@sparthamedical.eu(N.E.V.)摘要:医学领域的发展已经开放了在个性化患者层面进行分析的机会。可以进行的重要分析之一是对工程材料的细胞反应,最合适的非侵入性方法是成像。这些细胞的图像是未染色的Brightfield图像,因为在存在生物材料和流体的情况下,它们是从多参数微流体室获取的,这些室可能会随着时间的流逝而改变光路的长度,因为细胞的健康状态被监测。这些实验条件导致具有独特照明,纹理和噪声频谱的图像数据集。本研究通过将特征提取体系结构和机器学习分类器结合起来,探讨了监督细胞分类的优化,并重点介绍了生物材料风险评估中的应用。1。简介分析了三种细胞类型(A549,BALB 3T3和THP1)的Brightfield显微镜图像,以评估Inception V3,Squeeze Net和VGG16架构与分类器与包括KNN,决策树,随机森林,Adaboost,Adaboost,Neural Networks和Natan bayes的分类器配对的影响的影响。使用信息增益降低维度,以提高计算效率和准确性。使用不同参数的Butterworth过滤器用于平衡图像特征和降噪的增强,从而在某些情况下提高了分类性能。实验结果表明,与神经网络配对时,VGG16体系结构可实现通过不同指标衡量的更高分类精度。与未经过滤的数据集相比,使用Butterworth过滤器时的精度提高了,并且各种Butterworth滤波器之间的差异表明了优化这些类型图像的过滤器参数的重要性。关键字:生物材料风险评估,细胞图像分类,分类器,特征提取,个性化医学,监督分类。
背景:小干扰 RNA (siRNA) 在治疗各种肺部疾病方面具有巨大潜力,但缺乏安全有效的肺部 siRNA 递送系统阻碍了其进入临床。促进细胞增殖的表皮生长因子受体 (EGFR) 和在抑制细胞毒性 T 细胞活性中起关键作用的程序性细胞死亡配体 1 (PD-L1) 是治疗非小细胞肺癌 (NSCLC) 的两个重要靶点。在这里,我们探索了合成肽 PEG 12-KL4 将 siRNA 递送到小鼠的各种 NSCLC 细胞和肺组织的潜力。方法:使用 PEG 12-KL4 将针对 EGFR 和 PD-L1 的 siRNA 转染到 NSCLC 细胞中。使用免疫印迹法评估 siRNA 在 HCC827 和 NCI-H1975 NSCLC 细胞中的沉默效果。采用 CD8 + T 细胞介导的 NSCLC 细胞杀伤来证明 PD-L1 siRNA 敲低的功能效果。使用荧光 siRNA 来可视化细胞中的 siRNA 摄取,并在 BALB/c 小鼠中进行生物分布研究。结果:我们的结果表明,PEG 12 -KL4 可有效介导各种 NSCLC 细胞中 EGFR 和 PD-L1 的 siRNA 敲低。重要的是,PEG 12 -KL4 肽比商用 Lipofectamine 2000 试剂能够更好地实现 siRNA 递送。我们假设 PEG 12 -KL4 肽使 siRNA 能够逃脱或绕过内体降解,如共聚焦荧光成像所示。值得注意的是,在 NCI-H1975 细胞中联合敲低 EGFR 和 PD-L1 比单独敲低 PD-L1 产生更好的效应 T 细胞介导的癌细胞杀伤效果。此外,静脉给药后 PEG 12 -KL4/siRNA 复合物的生物分布表明肺部输送不良,荧光 siRNA 积聚在肝脏中。相反,气管内输送 PEG 12 -KL4/siRNA 复合物导致荧光 siRNA 在肺部被检测到,肾脏排泄延迟。结论:总之,我们证明了使用 PEG 12 -KL4 共同输送靶向 EGFR 和 PD-L1 的 siRNA 是可行的,并且代表了治疗 NSCLC 的一种有前途的未来策略,其中肺部 siRNA 输送有利于静脉给药。
抽象结核病(TB),欧洲的白瘟疫在包括巴基斯坦在内的世界许多地方仍然没有控制和致命。这是巴基斯坦人类和家畜发病率和死亡率的主要原因。在过去的二十年中,重组和DNA疫苗的一些令人鼓舞的结果是,在过去的一百年中没有开发新的疫苗。选择了五个特异性基因(RV0379,RV3914,RV3006,RV0432+SP和RV0432-SP)以开发DNA疫苗。使用裸DNA和Prime-Boost方法对小鼠进行了所有构建体。将45只BALB/C小鼠分为三个主要组; DNA疫苗组,BCG Prime Boost组和对照组。疫苗后(PV)和挑战后(PC)免疫反应。在血浆中也还检查了IFN-γ。 基于细胞因子ELISA PC免疫反应的在与BCG对照组相比(p <0.05)相比,基于裸DNA疫苗组(RV0379,RV3006和RV0432-SP)的TNF-α水平均显示出显着差异。 基于QRT PCR,IL-6,TNF-α,IFN-γ和IL-1β的DIV>在所有疫苗和BCG对照组之间没有显着差异(CT范围25-30)。 血浆中的IFN-γ水平分析了PC;两种疫苗RV3006/LPPZ和BCG PRIMED RV0432/SODC-SP(最高平均值1360.35 pg/ml)在63天时显示出显着的结果(截止值21pg/ml)。 与BCG和阴性对照组相比,所有疫苗构建体或组合中都具有显着的治疗作用。 亚洲J. Agric。 生物。在血浆中也还检查了IFN-γ。在与BCG对照组相比(p <0.05)相比,基于裸DNA疫苗组(RV0379,RV3006和RV0432-SP)的TNF-α水平均显示出显着差异。基于QRT PCR,IL-6,TNF-α,IFN-γ和IL-1β的DIV>在所有疫苗和BCG对照组之间没有显着差异(CT范围25-30)。血浆中的IFN-γ水平分析了PC;两种疫苗RV3006/LPPZ和BCG PRIMED RV0432/SODC-SP(最高平均值1360.35 pg/ml)在63天时显示出显着的结果(截止值21pg/ml)。 与BCG和阴性对照组相比,所有疫苗构建体或组合中都具有显着的治疗作用。 亚洲J. Agric。 生物。血浆中的IFN-γ水平分析了PC;两种疫苗RV3006/LPPZ和BCG PRIMED RV0432/SODC-SP(最高平均值1360.35 pg/ml)在63天时显示出显着的结果(截止值21pg/ml)。与BCG和阴性对照组相比,所有疫苗构建体或组合中都具有显着的治疗作用。亚洲J. Agric。生物。关键词:结核分枝杆菌,DNA疫苗,肿瘤坏死因子 - alpha,Interleukin-6,Interleukin-6,Interferon-Gamma,Interleukion-1Beta,bacille Calmette-guérin(BCG)针对分枝杆菌特异性基因,并用BCG提升质量。2024(3):2023158。doi:https://doi.org/10.35495/ajab.2023.158这是根据Creative Commons Attribution 4.0许可条款分发的开放访问文章。(https://creativecommons.org/licenses/4.0),只要正确引用了原始工作,就可以在任何媒介中进行无限制的使用,分发和复制。引言结核病(TB)是由单个
目的:肿瘤微环境中的髓系抑制细胞 (MDSC) 是免疫检查点癌症治疗的潜在治疗靶点,但 MDSC 靶向疗法尚未证明可以提高生存率。三叶因子家族 2 (TFF2) 是一种分泌性抗炎肽,可以抑制 MDSC 扩增并激活肿瘤免疫,部分是通过激动 CXCR4 受体 1-3 来实现的。本研究旨在调查新型 TFF2 - 白蛋白融合肽 (TFF2-MSA) 是否可以提高抗 PD-1 治疗的同基因结直肠癌 (CRC) 小鼠模型的生存率。方法:使用皮下移植到小鼠体内的细胞系开发了两种同基因结肠癌小鼠模型。 MC38 CRC 细胞被植入 C57BL/6 小鼠体内,而 CT26.wt CRC 细胞被植入 BALB/C 小鼠体内。我们生成了一种重组融合蛋白,称为 mTFF2-MSA,它包含与鼠血清白蛋白 (MSA) 融合的鼠 TFF2,目的是增加半衰期并减少给药频率。小鼠随后接受 mTFF2-MSA 或抗 PD-1 抗体(克隆 29F.1A12)或两者,并测量肿瘤体积和存活率。在终点,进行流式细胞术以检查治疗对免疫特征的影响。结果:在 MC38 模型中,施用 mTFF2-MSA 可抑制肿瘤生长(TGI 50%),mTFF2-MSA 和抗 PD-1 的组合具有附加作用并显着抑制肿瘤生长(TGI 87%)。该组合还显示 50 天后的存活率为 90%,而载体和单一 mTFF2-MSA 疗法分别为 20% 和 50%。通过流式细胞术使用抗 LAG3、TIM3 和 PD-1 抗体测量,联合治疗后引流淋巴结中耗竭的 CD8+ T 细胞百分比显著降低。在 CT26.wt 模型中,单独使用 mTFF2-MSA 效果不大,但抗 PD-1 和 mTFF2-MSA 的组合显示出显著的效果。在 CT26.wt 模型中,mTFF2-MSA 的给药可抑制肿瘤生长(TGI 16%),单独使用抗 PD-1(TGI 40%)以及 mTFF2-MSA 和抗 PD-1 的组合(TGI 60%)。结论:在晚期和转移性同基因小鼠结直肠癌模型中,使用 mTFF2-MSA 融合蛋白靶向 MDSC 与 PD-1 阻断疗法具有良好的协同作用。在另一篇摘要中,在单独的 ACKP(Atp4b-Cre;Cdh1-/-;LSL-KrasG12D;Trp53-/-)胃癌模型中也证明了 mTFF2-MSA 和抗 PD-1 抗体之间的附加效应,这表明联合治疗也可能适用于胃癌。
Torre-Cea I,Guerra-Paes E,Berlana-GalánP,Cáceres-Calle D,Carrera-Aguado I,Marcos-Zazo L,Sánchez-Juanes F,Muñoz-félixJM。 div>萨拉曼卡大学(USAL)和萨拉曼卡生物医学研究所(IBSAL)引言癌症的生物化学和分子生物学系可以从不同的治疗角度来解决癌症,具体取决于其特定特征;其中之一是肿瘤脉管系统,是致癌细胞生长和确定肿瘤微环境所必需的。 div>据此,当血管的形成是由已经形成的其他人形成时,可以将肿瘤归类为血管生成,或者当给出避免血管合成的过程时,肿瘤可以分类为血管生成。 div>提出最严重预后的非血管生成机制,如今似乎是对抗血管生成疗法的抗性是血管共同选择(VCO)。 div>在VCO肿瘤细胞中绑架了先前存在的血液组织血管,在与高度血管化器官相关的肿瘤中可能出现固有或响应不同的治疗方法。 div>这种血管策略中的一个重要点是使用整合素的肿瘤细胞粘附在细胞外基质和血管上,这反过来触发了细胞信号瀑布,从而增加了最严重的致癌特征的表达。 div>这项工作的主要目的是避免整联蛋白β1与配体的结合,以抑制具有这种耐药性的肺转移中的VCO,并使它们更容易受到化学疗法的影响。 div>材料和方法在4T1细胞系的非血管生长的体内BALB/C中进行了三个实验。 div>在其中,使用整合素α5β1:ATN-161,ISODGR和ATN-161的分子抑制剂比较三种治疗方法,并与卡泊蛋白结合使用。 div>该研究基于免疫组织化学和免疫荧光染色,使我们能够量化肿瘤大小,缺氧,血管和肺实质的变化,细胞外基质的纤维,淋巴细胞的纤维T CD8+抗肿瘤。 div>最后,分析了在光学显微镜下拍摄的图像,并进行了统计分析,T-学生和ANOVA。 div>不会改变肺实质,细胞外基质的纤维或淋巴细胞的浸润,但确实会增加这些血管的periticos覆盖范围。 div>在使用ISODGR的第二个模型中,尽管似乎有新容器和缺氧增加,但大小没有变化。 div>更改实质,但保持基质的纤维。 div>增加T CD8+淋巴细胞和periticos覆盖率的浸润。 div>