Hana Nedozrálová 1 , Pavel Křepelka 1 , Muhammad Khalid Muhammadi 2 , Žilka Norbert Žilka 2 , Jozef Hritz 1 1 Central European Institute of Technology, Masaryk University, Brno, Czech Republic, 2 Institute of Neuroimmunology, Slovak Academy of Science, Bratislava, Slovakia Background包括。旨在使病理tau蛋白聚集体的积累是许多神经退行性疾病的标志,包括阿尔茨海默氏病。神经元中错误折叠的tau的积累是有毒的,它破坏了细胞生理学,导致神经元死亡和tau在整个大脑中的传播。TAU病理的影响包括轴突运输,线粒体和溶酶体功能障碍以及突触变性。 尽管在理解tau病理学方面取得了进步,但最初的tau错误折叠,原纤维形成,跨连接的神经元的病理传播以及随后在单个神经元水平上的细胞毒性仍然不清楚。 我们的目的是直接在鼠类鼠模型的玻璃化脑组织中可视化分子结构的病理变化。 可视化天然超微结构的方法我们使用玻璃化的新鲜大脑而无需染色或固定。 我们将以低温为中心的离子束铣削(FIB)和生物对比度扫描电子显微镜(SEM)与羊角层上的冷冻电子层析成像(Cryo-ET)结合在一起。 Helios Hydra V显微镜的冷冻等离子体-FIB/SEM设置允许对非染色的玻璃体水合生物样品进行成像,在纳米分辨率中具有高生物学对比度的非染色玻璃化水合生物样品,允许体积成像覆盖比冷冻-ET中使用的典型lamella更宽的面积。TAU病理的影响包括轴突运输,线粒体和溶酶体功能障碍以及突触变性。尽管在理解tau病理学方面取得了进步,但最初的tau错误折叠,原纤维形成,跨连接的神经元的病理传播以及随后在单个神经元水平上的细胞毒性仍然不清楚。我们的目的是直接在鼠类鼠模型的玻璃化脑组织中可视化分子结构的病理变化。可视化天然超微结构的方法我们使用玻璃化的新鲜大脑而无需染色或固定。我们将以低温为中心的离子束铣削(FIB)和生物对比度扫描电子显微镜(SEM)与羊角层上的冷冻电子层析成像(Cryo-ET)结合在一起。Helios Hydra V显微镜的冷冻等离子体-FIB/SEM设置允许对非染色的玻璃体水合生物样品进行成像,在纳米分辨率中具有高生物学对比度的非染色玻璃化水合生物样品,允许体积成像覆盖比冷冻-ET中使用的典型lamella更宽的面积。导致此海报,我们介绍了原位可视化工作流程,并展示了初步的生物对比冷冻式纤维/SEM/SEM图像以及受tauopathy影响的鼠大脑组织的层状。结论我们表明,新型的生物对比度冷冻质量fib/sem成像工作流程可用于无需化学固定的病理组织的超微结构表征,并且与lamella callout和situ Cryo-et的结合为揭示神经变性细胞的细节提供了出色的工具。承认这项工作已获得捷克科学基金会(22-15175i)的资金。我们承认Cero-Electron显微镜和层析成像核心设施CIISB的CEITEC MU,指导CZ Center,由Meys CR(LM2023042)和欧洲区域发展基金会“ UP CIISB”(No.cz.02.1.01/0.0/0.0/18_046/0015974)。
8%聚丙烯酰胺凝胶。cDNA(-0.5 tg)范围为550至1500个碱基对,通过电装饰回收。使用末端脱氧核苷酸转移酶(20)与脱氧残基一起扩展了20 ng等分试样,并用PST I裂解并用Deoxyg残基尾巴(20)将PBR322的100 ng退火100 ng。通过公开的程序(23),使用退火的混合物用于转化大肠杆菌K-12菌株294(22)。制备诱导和未诱导的32P-CDNA探针。5 Zg的12S mRNA与2个寡核酸(DT)12-18(协作研究)或每个合成引物池(FIB 1至FIB 6)的2 Ig合并,在10mm Tris-HCl(pH 8),1 mm EDTA中。将混合物煮沸3分钟,然后在冰上淬火。60 ul of 40 mM Tris-HCl (pH 8.3), 40 mM KCl, 16mM MgCl2, 60 mM o-mercaptoethanol, 1 mM dATP, dGTP, dTTP and 5 x 10 7M (Q-32P) dCTP (Amersham, 2,000 - 3,000 Ci/mmole) was added to each template-primer mix at OC.在添加100个AMV逆转录酶后,将反应在42%C下孵育30分钟,并通过超过10 ml Sephadex G-50列的通道纯化。产品用
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在非小细胞肺癌中循环髓样源性抑制细胞的预后作用:系统评价和荟萃分析G Bronte,lCalabrò,lcalabrò,f olivieri,f olivieri,ad procopio,lcrinò临床和实验医学23(5),1551-1561,1551-1561,20223 Citazioni = 6 Priny fib-aprinary fib = 6 prib fib,晶体化学和生物学项目。 经过四年的研究,我们学到了什么? gualtieri,M Leoncini,S Fantone,S Di Valerio,S di Valerio,G Tossetta,Ad Procopio,...周期性矿物质学92(2),2023年,2023年,急性心肌症患者的心脏磁共振成果和形态磁性变化,Mrna covid-119 VA Rossi,P Gentile,A Uribarri,...在非小细胞肺癌中循环髓样源性抑制细胞的预后作用:系统评价和荟萃分析G Bronte,lCalabrò,lcalabrò,f olivieri,f olivieri,ad procopio,lcrinò临床和实验医学23(5),1551-1561,1551-1561,20223 Citazioni = 6 Priny fib-aprinary fib = 6 prib fib,晶体化学和生物学项目。经过四年的研究,我们学到了什么?gualtieri,M Leoncini,S Fantone,S Di Valerio,S di Valerio,G Tossetta,Ad Procopio,...周期性矿物质学92(2),2023年,2023年,急性心肌症患者的心脏磁共振成果和形态磁性变化,Mrna covid-119 VA Rossi,P Gentile,A Uribarri,...循环:心力衰竭,E010315,2023 4体内Covid-19通过检测犬进行筛查的敏感性和特异性:C19- Scionendog多中心研究的结果F Soggiu,J Sabbatinelli,J Sabbatinelli,j sabbatinelli,giuliani,giuliani,a benedetti,r benedeTETTI,Marmanegiani,pulmon heliy heliy heliy heliy heliy heliy heliy pluliy pluliy pluliy pluliy ats pl pulmon at 202 act 5),p3(5),指出5)(5) IN A STABLE PATIENT PRESENTING WITH RIGHT CARDIAC CHAMBERS THROMBOSIS: A TICKING CLOCK SCENARIO A Procopio, L Belli, M Molisana, V Cicchitti, U Ianni, A Toro, E Di Girolamo, ... European Heart Journal Supplements 25 (Supplement_D), D190-D191, 2023 C84 OUTCOME AND MORPHO–FUNCTIONAL CHANGES ON CARDIAC MAGNETIC RESONANCE IN PATIENT WITH ACUTE mRNA Covid 19接种疫苗接种M Palazzini,E Ammirati,L lupi,A Garascia,P Gentile,P Pedrotti,...欧洲心脏期刊补充25(补充_D),D35-D36,2023炎症和DNA损害:原因,效果或两种pezone,fezone,f olivieri,mv naperoi,a av napoli a vate napeiri Gabrielli Nature Reviews Rheumatology 19 (4), 200-211, 2023 20 A Data-Mining Approach to Identify NF-kB-Responsive microRNAs in Tissues Involved in Inflammatory Processes: Potential Relevance in Age-Related Diseases L Micolucci, G Matacchione, MC Albertini, M Marra, D Ramini, A Giuliani, ... International Journal of Molecular Sciences 24 (6),5123,2023 2 miR-422a通过MECP2下调促进脂肪形成,在人骨骨髓间充质干细胞A Giuliani,J Sabbatinelli,S Amatori,S Amatori,l Graciotti,l graciotti,Silvestrini,Silvestrini,Silvertini,A Silvortini,... silvorlini,...细胞和分子抑制80(3),75,75,75,75,15,15,15,15,15,15,15,15,15,15,15,15,15,15,15,15,15,15,15,153)前列腺癌患者的生存:系统评价和荟萃分析G Bronte,V Conteduca,M Landriscina,Ad Procopio Prostate Cancer和Prostatic疾病26(1),41-46,2023
术语 TiN:氮化钛 MgO:氧化镁 TMN:过渡金属氮化物 FCC:面心立方 B1:岩盐结构 UHV:超高真空 TEM:透射电子显微镜 STEM:扫描透射电子显微镜 HAADF:高角度环形暗场 DFT:密度泛函理论 MEAM:改进的嵌入原子方法 XRD:X 射线衍射 ToF-ERDA:飞行时间弹性反冲检测分析 BF:明场 FIB:聚焦离子束 SEM:扫描电子显微镜 FFT:快速傅里叶变换 DOS:态密度 FWHM:半峰全宽 GSFE:广义堆垛层错能 OP:重叠布居