液相色谱技术 完成本模块后,学生应能够使用不同类型的高效液相色谱 (HPLC) 仪器进行化学分析,例如反相色谱、离子色谱 (IC) 和液相色谱-质谱 (LCMS)。他们还将能够排除液相色谱仪器的故障并进行基本的日常维护。
bhimewalpriya@gmail.com摘要:高性能液相色谱法(HPLC)是一种重要的定性和定量技术,通常用于估计药物和生物样品。它是用于药物成分质量控制的最通用,最安全,最可靠,最快的色谱技术。本文编写了HPLC的不同方面的评论,例如原理类型,仪器和应用。高性能液相色谱在临床实验室中起着重要作用,用于分离和定量不同体液中的生物标志物。HPLC的发展涉及四个基本步骤;侦察,优化,鲁棒性测试和验证。该技术用于分析其纯度的药物和药物,并维持药品的最高标准,以帮助患者患有医疗问题。验证方法是用于确认用于特定测试的分析程序的过程。根据ICH指南验证高性能液相色谱法涵盖了验证的所有性能特征,例如准确性,精度,特异性,线性,线性,范围,检测极限,定量限制,稳健性,系统适用性。高性能液相色谱方法的限制,公共健康重要性和验证是自动化过程变得复杂,具有较低的分离功率,并且昂贵但高性能液相色谱法是现代诊断技术在所有领域都使用。关键字:HPLC,色谱,流动阶段
USP 的肽参考标准含量通常使用 HPLC 测定法与外部标准进行比较,而外部标准的纯度则通过质量平衡法确定。为了探索其他分析方法的使用,USP 生物制品部门进行了一项多实验室合作研究。该研究使用以下方法确定了肽定量的实验室间变异性:HPLC 测定法、定量核磁共振 (qNMR) 光谱法或氨基酸分析 (AAA)。比较了这三种方法对九肽催产素定量的适用性。在本研究中,使用与标准相同的肽散装材料的 HPLC 测定法显示出最低的实验室间变异性。计算变异系数 (%CV) 时不计算与质量平衡标准纯度分配相关的不确定性。质子qNMR法是直接测量肽与内标物的关系,在常见的实验室条件下并不难操作。由于操作简单,分析时间短,qNMR作为肽参考标准值分配的主要方法值得进一步探索。
USP 的肽参考标准含量通常使用 HPLC 测定法与外部标准进行比较,而外部标准的纯度则通过质量平衡法确定。为了探索其他分析方法的使用,USP 生物制品部门进行了一项多实验室合作研究。该研究使用以下方法确定了肽定量的实验室间变异性:HPLC 测定法、定量核磁共振 (qNMR) 光谱法或氨基酸分析 (AAA)。比较了这三种方法对九肽催产素定量的适用性。在本研究中,使用与标准相同的肽散装材料的 HPLC 测定法显示出最低的实验室间变异性。计算变异系数 (%CV) 时不计算与质量平衡标准纯度分配相关的不确定性。质子qNMR法是直接测量肽与内标物的关系,在常见的实验室条件下并不难操作。由于操作简单,分析时间短,qNMR作为肽参考标准值分配的主要方法值得进一步探索。
摘要。– 目的:口腔液被证明是法医环境中评估药物消费的有效基质。最近,与新型精神活性物质有关的中毒事件数量不断增加,引起了科学界的关注。为此,开发并验证了检测和量化口腔液中 NPS 的不同分析方法,其中大多数基于连字符技术。材料和方法:在多学科研究数据库中进行了广泛搜索,单独或组合使用“新型精神活性物质”、“口腔液”、“毒理学分析”、“分析方法”、“靶向方法”、“HPLC-MS/MS”、“GC-MS”、“GC-MS/MS”作为搜索字符串。考虑了 2017 年至 2021 年期间发表的所有研究文章。结果:文献中报道了检测和量化口腔液中 NPS 的不同色谱-光谱法。所研究的 NPS 类别包括合成大麻素、合成卡西酮、新型苯二氮卓类、合成阿片类、芬太尼类似物、色胺和苯乙胺。最常用的技术是 HPLC-MS/MS,因为它灵敏度高、通量高。对于合成大麻素,GC-MS 技术是首选,尽管开发了不同的 HPLC-MS/MS 方法。此外,LC-HRMS 技术用于开发检测新型合成阿片类和芬太尼类似物的分析方法。结论:口腔液作为评估药物暴露的有效基质,其分析兴趣日益增加。联用技术被证明可有效检测口腔液中的 NPS。最合适的技术是 HPLC-MS/MS,因为它具有灵敏度高,并且能够在一次分析中涵盖不同类别的物质。
用于 HPLC 梯度分析。通过临界波长的梯度控制洗脱和漂移可确保无峰基线。GOLD 质量,过滤深度为 0.1 µm,适合 UPLC 分析。更多
denhem harman是预示着生物体衰老的第一位科学家,这是由产生自由基反应产物的分子病变的积累引起的[1]。因此,他创造了“自由基疾病”一词,以表示与年龄有关的病理学等病理[2]。ever,关于人主动脉中动脉粥样硬化病变区域中游离辐射氧化(FRO)产物含量的第一个实验数据是相当矛盾的[3,4]。不早于二十年后,在动脉粥样硬化患者的主动脉尸检样品中,诸如高性能液相色谱(HPLC)诸如高性能液相色谱(HPLC)的明显升高,这是脂肪氧滴(LOOH)的主要升高[5,6]。重要的是,在人体主动脉局局部动脉粥样硬化损伤的区域中,HPLC采用圆柱使用柱子的LOOH的S和r立体观察到了相等数量的s和r立体,这证明了由于自发性(非酶)的形成,该损害因其自发性(非酶)而形成。同时观察到关键抗氧化剂酶的活性减少,例如Cu,Zn-羟氧化物歧化酶(Cu,Zn-Sod)和含有谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性减少。这些数据假设动脉粥样硬化的特征是生产的产生和利用之间的失败[5,8,9]。基于这些结果,可以可靠地将动脉粥样硬化作为“自由基病理学” [5]。
Ahmad,A,Khan,R和Alkharfy,K.2014。 RP-HPLC方法的开发和验证,用于同时估计血浆及其在药代动力学中的应用。 Originanl Paper Chomatographica。 第3(5)卷:33Ahmad,A,Khan,R和Alkharfy,K.2014。RP-HPLC方法的开发和验证,用于同时估计血浆及其在药代动力学中的应用。Originanl Paper Chomatographica。第3(5)卷:33
此外,色谱柱相选择性是调整 HPLC 分离选择性的四个最有力和最有用的参数之一(见表 B)。对于可电离分析物,流动相 pH 是迄今为止最有效的参数。然而,色谱柱固定相在改变 UHPLC 和 HPLC 分离的相对保留方面的能力与有机改性剂选择(乙腈与甲醇)和有机改性剂百分比/梯度陡度相当。在开发方法时,有多种方法可以实现满足特定分辨率和保留要求的分离。一种方法是采用系统方法并筛选多个相。HALO ® 色谱柱有几种不同的固定相,可用于各种类型的分析。表 C 显示了可用于小分子反相分离的 HALO ® 相,这些相根据其选择性差异列出