抽象目的是越来越多的人工耳蜗候选者表现出残留的内耳功能,植入物插入过程中的听力保存策略变得越来越重要。手动植入已知会诱导创伤和压力峰。在这项研究中,我们使用经过验证的维特罗模型来全面评估一种新型的手术工具,该工具通过镊子的机动运动来解决这些挑战。使用侧壁电极的方法,我们检查了两个插入的亚组:经验丰富的外科医生手动执行了30次插入,并在同一外科医生的监督下使用机器人辅助系统进行了另外30个插入。我们利用了颞骨的现实,经过验证的模型。该模型准确地再现了摩擦后的摩擦条件,并允许对力学结构,当2型式后压力以及Scala Tympani内电极阵列的位置和变形进行力同步记录。结果,我们与常规程序相比,在机器人辅助插入过程中的力变化显着降低,平均值分别为12 mn/s和32 mn/s。机器人辅助也与强压峰的显着降低和2B降低有关。此外,我们的研究强调,插入工具的释放代表了需要手术训练的关键阶段。与手动技术相比,结论机器人援助表现出更一致的插入速度。它的使用可以显着减少与2肢内创伤相关的因素,从而突出其改善听力保存的潜力。最后,该系统不会减轻随后的手术步骤(例如电极电缆路由和人工耳蜗访问密封)的影响,指向需要进一步研究的领域。
摘要 目的. 将穿透性神经探针插入大脑对于神经科学的发展至关重要,但它涉及各种固有风险。原型探针通常插入水凝胶基大脑模型中,并分析其机械响应以了解体内植入期间的插入力学。然而,人们对神经探针在水凝胶大脑模型中插入动力学的潜在机制,特别是开裂现象,仍了解不足。这种知识差距导致在将模型研究获得的结果与在体内条件下观察到的结果进行比较时出现误解和差异。本研究旨在阐明探针的锐度和尺寸对探针插入水凝胶模型时出现的开裂机制和插入动力学的影响。方法. 系统地研究了由尖端角度、宽度和厚度定义的不同柄形状的假探针的插入。透明水凝胶中插入引起的裂纹用不混溶染料加重,通过原位成像跟踪,并记录相应的插入力。开发了三维有限元分析模型来获得探针尖端和幻像之间的接触应力。主要结果。研究结果揭示了一种双重模式:对于尖锐、细长的探针,由于与插入方向一致的直裂纹不断扩展,插入力在插入过程中始终保持在较低水平。相反,钝的、厚的探针会产生很大的力,并且随着插入深度的增加而迅速增加,这主要是由于形成了具有锥形裂纹表面的分支裂纹,以及随后的内部压缩。这种解释挑战了传统的理解,即忽视了开裂模式的差异,并将增加的摩擦力视为导致更高插入力的唯一因素。通过实验确定了区分直裂纹和分支裂纹的关键探针锐度因素,并从三维有限元分析中得出了两种开裂模式之间转变的初步解释。意义。本研究首次提出了神经探针插入水凝胶脑模型时两种不同开裂模式的机制。建立了开裂模式与插入力动力学之间的相关性以及探针锐度的影响,通过模型研究为神经探针的设计提供了见解,并为未来研究探针植入过程中脑组织开裂现象提供了参考。
一个困难的基因组编辑目标是大型遗传构建体的位点特异性插入。我们在此描述了 GENEWRITE 系统,其中 Cas 内切酶的位点特异性靶向活性与人类逆转录转座子 LINE-1 的 ORF2p 蛋白的逆转录酶活性相结合。这是通过提供两种 RNA 来实现的:一种靶向 Cas 内切酶活性的向导 RNA 和一种编码所需插入的适当设计的有效载荷 RNA。我们使用大肠杆菌作为开发和部署的简单平台,表明通过适当的有效载荷设计和辅助蛋白的共表达,GENEWRITE 可以使用所述方法将大型遗传有效载荷插入精确位置,尽管存在脱靶效应。基于这些结果,我们描述了在更复杂的系统中实施 GENEWRITE 的潜在策略。
精确的序列插入或植物中的替代在技术上具有挑战性,但在农作物育种中至关重要,因为许多农艺性状都受DNA碎片变化的影响。尽管已连续优化了素数(PE)以改善练习剂(Jiang etal。,2022; li etal。,2022a,b; Zong et al。,2022),但对于靶向插入或更换长时间的靶向插入还是不明显的。Similar strategies, twinPE (Anzalone et al ., 2022 ) and GRAND editing (Wang et al ., 2022 ), in which a pairofPEguideRNAs(pegRNAs)arepartially complementarytoeach other in their reverse transcriptase template (RTT) but are not homologous to the genomic sequences, were recently developed to facilitate longer sequence insertion (Figure 1a ).HPPD抑制剂除草剂(例如B-三酮)有效地控制出现的抗性杂草。水稻中的HIS1基因赋予了对三酮除草剂的广谱耐药性,而在Triketone敏感的Indica品种中发现了功能失调的HIS1等位基因(Maeda等,2019)。A genetic survey for 631 Indica varieties commonly used in rice breeding revealed that the 28-bp deletion is widely distributed, including 50.7% 3-line restorers, 40.7% 2-line restorers and 18.1% conventional varieties (Lv et al ., 2021 ), which causes a huge risk for applying HPPD-inhibitor herbicides in Indica rice cultivating area.s1035是一种精英常规的Indica品种,由于HIS1的28 bp缺失,对Triketone敏感。PE和大编辑策略已被测试以插入28 bp
转基因作物的商业化需要严格的安全评估,包括对插入的 T-DNA 进行精确的 DNA 水平表征。过去,已经开发了几种识别 T-DNA 插入位点的策略,包括南方印迹和不同的基于 PCR 的方法。然而,这些方法通常难以扩大规模以筛选数十种转基因事件和具有复杂基因组的作物,如马铃薯。在这里,我们报告使用目标捕获测序 (TCS) 来表征马铃薯中 34 个转基因事件的 T-DNA 结构和插入位点。这个 T-DNA 是左右边界之间的 18 kb 片段,携带三个抗性 (R) 基因(RB、Rpi-blb2 和 Rpi-vnt1.1 基因),可完全抵抗晚疫病。使用 TCS,我们在 T-DNA 和连接区域内获得了高序列读取覆盖率。我们确定了 85% 转基因事件两端的 T-DNA 断点。约 74% 的转基因事件的 T-DNA 中 3 个 R 基因序列完整。一半转基因事件的 T-DNA 侧翼序列来自马铃薯基因组,约三分之一 (11) 的转基因事件在马铃薯基因组中定位了一个 T-DNA 插入,其中五个事件不会中断现有的马铃薯基因。使用 PCR 和 Sanger 测序确认了 6 个最佳转基因事件的 TCS 结果,这 6 个转基因事件占适合监管部门批准的转基因事件的 20%。这些结果证明了 TCS 在转基因作物中精确表征 T-DNA 插入方面具有广泛的适用性。
使用基因编辑技术将大型DNA片段的精确精确插入到体细胞中,以标记或修饰内源性蛋白质仍然具有挑战性。由非同源末端连接途径产生的非特异性插入/删除(Indels)使过程容易出错。此外,插入物不容易移动。在这里,我们描述了一种称为Crisp R介导的E Xon(Crispie)的方法,该方法可以使用基于CRISPR/CAS9的编辑精确,可逆地标记内源性蛋白质。crispie插入了设计器供体模块,该模块由编码内含子序列的蛋白质序列的外显子组成,并将其内含子序列置于目标基因的内含子位置。插入连接处的Indels将被剪接,而mRNA几乎没有错误。我们使用Crispie在体内在哺乳动物神经元中荧光标记内源性蛋白,并以前未能达到的效率。我们证明了此方法广泛适用,并且以后可以轻易删除插入物。Crispie允许具有高保真,效率和灵活性的蛋白质序列插入。
。cc-by 4.0国际许可(未经Peer Review尚未获得认证)是作者/资助者,他已授予Biorxiv的许可证,以永久显示预印本。这是该版本的版权持有人,该版本发布于2020年12月3日。 https://doi.org/10.1101/2020.12.03.409417 doi:Biorxiv Preprint
目标:这项研究的目的是提高我们对插入侧壁耳蜗电极阵列涉及的机械的理解。设计:三名经验丰富的外科医生进行了一系列30个插入实验。根据已建立的软手术指南,在先前验证的人工颞骨模型中进行了实验。使用体外设置使我们能够全面评估相关参数,例如插入力,当经压力内压力和精确的电极阵列在受控且可重复的环境中。结果:我们的发现表明,在插入的后半部分中,强烈的后偏压瞬变更频繁,并且重新填充电极阵列是这种现象中的一个明显因素。对于选择最佳插入速度,我们表明,平衡缓慢运动以限制速度限制持续时间的缓慢运动至关重要,以限制震颤引起的压力尖峰,这挑战了一个普遍的假设
表皮生长因子受体(EGFR)突变的发现极大地改变了晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者的临床前景。与最常见的EGFR突变(例如外显子19缺失(del19)和外显子21 L858R点突变)不同,EGFR外显子20插入突变(EGFR ex20ins)是一种罕见的EGFR突变。由于其结构特异性,其对传统的表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)表现出原发性耐药,导致患者总体生存预后不佳。近年来,针对EGFR ex20ins的新药研发不断取得进展,为该患者群体的治疗带来了新的希望。对此,我们对EGFR ex20ins的分子特征、诊断进展、治疗现状进行了系统综述。总结了相关药物研发和临床研究的最新数据,旨在为临床诊断、治疗及药物研发提供参考。
r = [ x, y, z ] 笛卡尔坐标系中的位置向量及其元素 a G = [ a G x , a G y , a G z ] 标准化重力加速度 er 小行星轨道偏心率 ar 小行星轨道半长轴(米) fr 小行星轨道真异常(弧度) U 与小行星谐波相关的标准化重力势能 d 太阳与小行星之间的距离 LU 距离单位 TU 时间单位 β 太阳辐射压标准化加速度 a SRP 太阳辐射压非标准化加速度(米/秒2) γ 反射率 p 0 太阳通量常数(千克·米/秒2) m 探测器质量(千克) A 探测器投影面积(米2) μ S 太阳引力参数(米3/秒2) μ 小行星引力参数(米3/秒2) P 勒让德多项式 l, m 考虑的谐波的阶数和次数 C lm , S lm 库存系数 φ 小行星固定框架中的纬度(弧度) λ 经度(弧度) n 平均运动(弧度/秒) CJ 雅可比积分(米2/秒2) vc 临界速度(米/秒) vo 二体问题中的圆轨道速度(米/秒) vm 速度裕度(米/秒) a 航天器轨道的半长轴(米) e 航天器轨道的偏心率 I 航天器轨道的倾角 W 航天器轨道上升节点的经度 w 航天器轨道的近地点增强 f 航天器轨道的真异常