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表皮生长因子增强的新型转化生长因子：从非肿瘤组织中分离
摘要 表皮生长因子 (EGF) 可诱导非肿瘤大鼠肾成纤维细胞在细胞培养中发生转化表型，这些转化表型是从成年小鼠的许多非肿瘤组织（包括颌下腺、肾脏、肝脏、肌肉、心脏和大脑）中分离出来的。它们与之前描述的从肿瘤细胞中分离出来的转化生长因子 (TGF) 类似，具体如下：它们可通过酸/乙醇提取，并且是酸稳定的低分子量 (6000-10,000) 多肽，需要二硫键才能起作用，并且它们会导致非肿瘤指示细胞的锚定非依赖性生长，而这些细胞在没有它们的情况下不会在软琼脂中生长。从雄性小鼠的颌下腺中对这些 TGF 进行部分纯化，结果表明它们不同于 EGF。与之前描述的细胞外 TGF 不同，但与来自肿瘤细胞的某些细胞 TGF 一样，它们通过 EGF 增强其促进锚定非依赖性生长的能力。颌下腺 TGF 蛋白的等电点接近中性。在 Bio-Gel P-30 上进行色谱分析，然后进行高压液相色谱分析，总纯化率达到 22,000 倍。在 EGF 存在下进行测定时，最纯化的蛋白质在 1 ng/ml 的软琼脂中具有诱导生长的活性。这些数据进一步证明了肿瘤形成可能是由非肿瘤生化过程的定量而非定性改变引起的。我们最近描述了 (1) 从几种肿瘤小鼠组织（包括由莫洛尼肉瘤病毒 (MSV) 转化的成纤维细胞和最初由化学致癌物诱导的可移植膀胱癌）中分离和表征一组低分子量、酸稳定性多肽（称为转化生长因子 (TGF)）。这些多肽是可通过酸/乙醇提取的细胞内蛋白质。类似的细胞外转化多肽，称为肉瘤生长因子 (SGF)，是由 De Larco 和 Todaro (2) 从培养的 MSV 转化小鼠成纤维细胞的条件培养基中首次分离出来的。最近报道了几种其他细胞外转化多肽，它们来源于人类 (3) 和动物 (4) 来源的肿瘤细胞。所有这些多肽在应用于培养的未转化、非肿瘤指示细胞时都会引起以下一系列变化，这些变化为 TGF 提供了一个操作性定义：(i) 单层细胞密度依赖性生长抑制的丧失；(ii) 单层细胞过度生长；(iii) 细胞形状改变，导致指示细胞呈现肿瘤表型；(iv) 获得锚定独立性，从而能够在软琼脂中生长。未转化的非肿瘤细胞不会在软琼脂中形成逐渐生长的菌落，并且培养细胞的这种不依赖锚定的生长特性与体内肿瘤的生长具有特别高的相关性（5-7）。
人类P2
寡脱氧核苷酸的杂交特性已经以多种技术为特征（1-4）。在适当条件下，寡核苷酸与DNA中的特定位点杂交（4，5）。此外，可以将完美的碱基配对的核苷酸双链体与包含单个不匹配的碱基对（4-6）的复式区分开。我们利用寡核苷酸的杂交特性在开发一种分离特定克隆的DNA序列的方法中（5）。我们的一般方法是化学合成寡核苷酸的混合物，这些寡核苷酸代表给定蛋白的一小部分氨基酸序列的所有可能的密码子组合。在该混合物中必须是与蛋白质该部分编码的DNA相结合的一个序列。这种互补的寡核苷酸将与来自蛋白质的编码区域的DNA形成完美的基础复式，而混合物中的其他寡核苷酸将形成不匹配的双链体。在严格的杂交结合下，只有完美匹配的双链体将形成，从而允许将寡核苷酸的混合物用作特定的杂交探针。混合序列寡核苷酸探针应允许分离出已知氨基酸序列的任何蛋白质的克隆DNA序列。我们已将这种方法应用于人A2-微球蛋白（AM）的克隆cDNA序列的分离。AM是一种从尿液中分离出来的小蛋白（分子量11,800）。随后，发现A3〜m与主要组织相容性基因座的细胞表面抗原相关（8、9）。A2M的确切功能尚不清楚，尽管最近的证据表明该分子可以稳定辅助蛋白的三级结构（10）。氨基酸序列已从包括人类在内的四个物种中定位为F2M（11）。我们已经使用氨基酸序列来设计探针，以分离到人类2M的克隆cDNA。
从蔬菜中分离微生物污染物
抽象蔬菜是植物的可食用部分。蔬菜微生物变质的发生被认为是对人和动物的潜在健康危害的根源。该研究的重点是隔离微生物，尤其是细菌和真菌与销售蔬菜。样品，并使用标准的微生物学分析来分离细菌和真菌。分离出的八个细菌分离株是Brevibacillus brevi，枯草芽孢杆菌，branmehamlla cattarhalis，Escherichia coli，Salmonella Typhi，Pseudomonas atruginosa，Serrratia Marcscen和Chaphyloccus sp。也分离出四个真菌分离株；曲霉曲霉，尼日尔曲霉，青霉人SP，糖疗法sp。胡椒（Capsicum Annuum）的细菌计数最高（6.53×10 9 CFU/mL），而Shoko（Argentia celosia Argentia）的真菌计数最高（5.45×10 9 CFU/mL）。在这项研究中，这些蔬菜的真菌和细菌污染的高流行率在耕种，收获，运输或销售时描绘了对这些食物材料的卫生处理。因此，需要通过适当清洗和消毒这些产品来保护最终消费者的健康，这些产品以其原始形式消费。键盘：细菌分离株，微生物负荷，蔬菜。简介蔬菜一词在15世纪初首次用英语记录。它来自旧法国，最初用于所有植物。在生物学环境中，这个词仍然在这种意义上使用。它源自中世纪的拉丁植物，意为“成长”，“繁荣”（沃顿，1970年）。蔬菜是植物的可食用成分。这通常意味着植物的叶子，茎，灯泡，种子和根。但是，蔬菜一词不是科学的，其含义主要基于烹饪和文化传统（ICMSF，1986； Bankefa，2013； Akinyele等al。，2013年）。蔬菜是食物的重要保护成分，对维持健康和预防疾病非常有益。它们含有不同比例的维生素，例如维生素A，K，B6，Provitamin，饮食
翠鸟柔性自动隔离病毒DNA/RNA的方案| neb
用户为绑定和洗涤步骤提供所需的翠鸟柔性塑料，其中包括96个深层井板（2.0毫升），以及用于洗脱步骤的96个微板（200μl）。还需要一个深孔梳子梳子，并用作磁杆的盖子，A
T4 DNA连接酶（M0202）CHN
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血液DNA隔离试剂盒（磁珠系统）
血液DNA隔离试剂盒（磁珠系统） - 50个Preps产品插入产品＃59800 NORGEN的血液基因组DNA分离（磁珠系统）设计用于快速制备基因组DNA，从包括人类在内的各种物种（包括人）的最多200 µL全血。纯化基于磁珠作为分离矩阵。Norgen的磁珠在优化的盐浓度下结合DNA，并在低盐和略微碱条件下释放结合的DNA。基因组DNA优先从其他细胞蛋白质成分中纯化。基因组DNA的典型产率将根据血液样本的细胞密度而变化。纯化的基因组DNA在测试的所有限制酶中完全消化，并且与包括实时PCR，NGS和微阵列分析在内的下游应用完全兼容。纯化的DNA是最高质量的，可以手动或使用自动化平台Isopure™提取。也可以通过进行较小的更改来轻松修改该协议，以便能够在其他基于磁珠的自动化平台上运行，例如Kingfisher™Flex 96和Hamilton Magex Star Platforms。NORGEN的纯化技术纯化是基于在优化结合条件下结合DNA的磁珠的使用。NORGEN的血液DNA分离（磁珠系统）试剂盒可从包括人类在内的各种不同的血液样本中分离基因组DNA。裂解缓冲液B和蛋白酶K被添加到样品中，在55°C下混合并孵育以裂解细胞。 纯化的DNA可用于许多下游应用。裂解缓冲液B和蛋白酶K被添加到样品中，在55°C下混合并孵育以裂解细胞。纯化的DNA可用于许多下游应用。然后将乙醇添加到裂解液中，然后将其转移到微量离心管中。磁珠A被添加到清洁上清液中，并将所得的溶液放在磁分离架上。只有DNA才会与磁珠结合，而大多数蛋白质将在上清液中除去。然后用溶液WN和70％乙醇洗涤结合的DNA，以去除任何杂质，并用洗脱缓冲液洗脱纯化的总DNA。规格
对乳酸细菌的分离和初步筛选，从生牛奶中为抗菌潜力
乳酸细菌（LAB）因其在食品保存中的作用及其产生细菌素的潜力而被广泛认可，天然抗菌肽有效地针对各种粮食源性病原体。本研究的重点是从摩洛哥南部和北部收集的生奶样品中产生细菌素的实验室菌株的分离和表征。表型和基因型方法用于鉴定分离的菌株，并针对包括大肠杆菌和沙门氏菌属的普通食源性病原体评估了它们的抗菌活性。结果表明，有几种实验室菌株具有明显的细菌素产生和对靶病原体的强烈抑制作用。这些发现突出了这些菌株在食品行业中的潜在应用，尤其是为了提高发酵食品的安全性和保质期。这项研究为将来研究实验室作为天然食品防腐剂的生物技术剥削提供了基础。
检测苏丹Shendi镇不同临床标本的细菌分离细菌分离细菌的抗菌活性（Trigonella foenum graecum）提取物
酸）和含有神经蛋白的食欲刺激剂。植物提取物的抗菌活性可能存在于多种不同的成分中[4]。fenugreek（Trigonella foenum-graecum）属于Fabaceae家族，自远古时代以来一直是必不可少的香料[5]。细菌分为革兰氏染色的生物和未染色的生物。容易染色的生物分为四类：革兰氏阳性球菌，革兰氏阴性球，革兰氏阳性杆和革兰氏阴性杆[6,7]。Trigonella feonum-Graecum，通常被称为英格兰的Fenugreek，日本Koroha，India Methi和China Kudu，Fenugreek，fafaceae家族[8]。一年一度的植物，胡芦巴高度为20-60厘米。在长豆荚中成熟的叶子和种子，用于制备用于药用使用的提取物或粉末[9,10]。fenugreek具有改善生物系统健康和功能的许多营养和生物活性化合物。胡芦巴种子具有58％的碳水化合物，23-26％的蛋白质，0.9％的脂肪和25％的纤维。同样，胡芦巴是关键氨基酸的丰富来源，例如天冬氨酸，谷氨酰胺，亮氨酸，酪氨酸和苯丙氨酸[2]。Trigonella feonum-Graecum是记录史上认可的最古老的药用植物之一[11]。仍需要探索体外繁殖植物作为新药来源的潜在用途。基于几项研究性研究，在体内植物中产生的化合物可以在体外种植植物中以相同或不同的水平产生[12]。fenugreek种子具有降血糖和低血糖胆固醇症状，提高边缘葡萄糖消耗，有助于增强葡萄糖的接受度，并在胰岛素受体水平以及胃肠道水平上通过替代品对降糖影响受到降解影响[13]；种子还用于治疗胃溃疡，肠炎，尿路感染[14]，胡芦巴种子和芽芽剂可与革兰氏阴性菌的变化（例如Escherichia coli和Gram阳性）（例如金黄色葡萄球菌）进行操作[15]。
人类神经类器官突触结构的分离和表征
突触体传统上是从啮齿动物或死后人类脑组织中富集的，但啮齿动物模型缺乏人类特有的突触特征，而死后组织中突触体的功能受到死后间隔的限制，并且通常仅显示疾病终点。此外，由于道德问题和可用性问题，只有少数研究针对人类样本。然而，神经类器官 (NO) 已成为分离完整和活的人类神经末梢以研究人类特有的突触传递方面的可能新来源。此外，突触体的富集通常使用密度梯度离心进行，这需要大量的起始材料。在本研究中，我们开发了一种应用差速离心方案从人类 NO 中富集突触结构的方法。然后，我们使用基于质谱的定量蛋白质组学来记录突触和生长锥特异性蛋白的富集，并在 KCl 刺激下进行定量磷酸化蛋白质组学来证明衍生突触结构的活力和生理功能。
猪肉芽生菌在体外分泌的细胞外囊泡的隔离和表征
摘要：细胞外囊泡的分泌，EVS，是原核生物和真核细胞的常见过程，用于细胞间交流，生存和发病机理。先前的研究表明，来自细菌纯培养物的上清液中的EV存在，包括革兰氏阳性和革兰氏阴性的聚糖降解肠道分子。但是，复杂微生物群落分泌的电动汽车的隔离和表征尚未清楚地报告。在最近的一篇论文中，我们表明，木材衍生的复杂β -mannan与常规饮食纤维具有结构性相似，可用于调节猪肠道肠道菌群的组成和活性。在本文中，我们研究了24小时在复合β -Mannan富集后，猪粪便菌群分泌的EV的产生，大小，组成和蛋白质组。使用透射电子显微镜和纳米颗粒跟踪分析，我们以165 nm的平均大小识别电动汽车。我们利用猪蛋白的基于质谱的元蛋白质蛋白基于猪蛋白的数据库，并从猪群中鉴定出355个元基因组组装的基因组（MAG），从而鉴定出303蛋白。对于从β -mannan生长的培养物中分离出来的EV，大多数蛋白质映射到两个MAGS MAG53和MAG272，分别属于梭菌和细菌。此外，具有第三次蛋白质的MAG为MAG 343，属于肠杆菌阶。在β -Mannan EV蛋白质组中检测到的最丰富的蛋白质参与了翻译，能量产生，氨基酸和碳水化合物转运以及代谢。总体而言，这项概念验证研究表明，从复杂的微生物群落中释放出的电动汽车的成功隔离。此外，电动汽车的蛋白质含量反映了特定微生物对可用碳水化合物源的响应。