影响最终选择单个原材料的主要因素如下。1 成本和可用性:理想情况下,材料应价格低廉、质量稳定并全年供应。2 固体或液体形式的易于处理性,以及相关的运输和储存成本,例如温度控制要求。3 灭菌要求和任何潜在的变性问题。4 配方、混合、络合和粘度特性可能会影响发酵和下游加工阶段的搅拌、通气和起泡。5 达到的目标产品的浓度、其形成速率和每克底物的产量。
图 1. 有效去除宿主基因组 DNA,同时不降低噬菌体 DNA 产量。使用 Norgen 的噬菌体 DNA 分离试剂盒从四种富集噬菌体培养物中分离总 DNA。在添加提供的裂解缓冲液之前进行 DNase I 预处理。简而言之,将 20 单位 DNase I 添加到 1 mL 富集噬菌体培养物中,并将混合物在室温下孵育 20 分钟。DNAase I 处理后,按照程序进行。作为对照,使用 Norgen 的噬菌体 DNA 分离试剂盒从相同 4 种培养物的等分试样中分离 DNA,而无需进行 DNase I 处理。对于 DNA 分析,将每 50 µL 洗脱液中的 10 µL 上样到 1X TAE 琼脂糖凝胶上。可以看出,噬菌体 DNA 被其外壳蛋白安全地保护起来,免受 DNase I 处理的影响,而宿主基因组 DNA 则被 DNase I 有效降解。因此,DNase I 预处理导致最终噬菌体洗脱中宿主 gDNA 污染较少,而不会影响总噬菌体 DNA 产量。M 号泳道为 Norgen 的 Highranger 1 kb DNA Ladder(货号 11900)
摘要本研究报告了奶牛场的流产,腹泻和牛奶生产急剧下降。该农场通常用进口疫苗接种了针对BVDV的疫苗,其中含有典型的Pestiviruses菌株(BVDV-1和BVDV-2)。从流产的母牛和显示持续性腹泻的奶牛中收集了总共13个血清样品,5个阴道排放样品和5个粪便样品。使用PCR筛选所有样品的潜在微生物原因(病毒或细菌)。在测试的23个样品中,只有一个阴道放电样品在预期的288 bp下产生了阳性的PCR结果。设计的引物是对基于5'-UTR的RTPCR测定法的高灵敏度,用于检测Pestiviruses。将PCR产品发送进行序列分析,并将结果提交给GenBank登录号#OR425033,并设计为GERD/VSVRI/PESTI-GIRAFFE/2022。然后通过三个连续的盲传中成功地在MDBK细胞中成功分离并传播该病毒。在病毒后接种后2-3天观察到了一种明显的细胞质效应(CPE),其特征是感染后72小时,其特征是液泡,细胞舍入和簇形成。pcr均在每个段落上进行,并以预期的大小给出了一个特定的频带。通过序列比对和系统发育分析的进一步分析表明,分离株与Pestivirus长颈鹿密切相关,尤其是Pestivirus PG-2。这标志着该菌株在埃及的检测,隔离和表征的第一个记录。因此,这种流行是由埃及记录的新引入的菌株引起的。因此,进口的疫苗无法提供保护,需要更新当地的疫苗以包括此Pestivirus菌株。关键字:Pestivirus PG-2,PNS,MDBK,5`UTR,CPE,系统发育分析,PCR,BDV,
kappaphycus alvarezii(doty)doty ex silva是一种广泛培养的针对角叉菜胶多糖的红色海藻,也是有价值的色素性脂素(PE)的潜在来源。因此,本研究的目的是从K. alvarezii中提取植料,评估其抗菌,抗氧化剂和抗癌活性,并确定其未来治疗应用的生物医学潜力。发现从K. Alvarezii提取的植物素化色素的蛋白质含量为69.84%,显示出极好的抗菌活性,抗杀菌性的oxytoca和Proteus mirabilis,最小抑制区为11 mm。使用总抗氧化剂,过氧化氢清除,减少功率,DPPH和ABTS测定法显示出显着的体外抗氧化活性。此外,颜料对人肺癌细胞系表现出有效的细胞毒性,IC 50值为131.7
分离,乳酸细菌的生化和分子表征从尼日利亚传统上发酵的酸奶饮料 *oyedokun n.o.1,2 Oyeleke S.B. 2,Abioye O.P. 2和Bala J.D. 2 1尼日利亚阿布贾的国家生物技术发展局食品与工业生物技术部,国家生物技术发展局。 2尼日利亚尼日利亚州米纳市的联邦科技大学生命科学学院微生物学系,P.M.B 65。 *通讯作者的电子邮件地址:nofisatoyedokun@gmail.com电话:+2348032471573摘要乳乳酸细菌(LAB)被确定为由于健康促进的影响,它们对人类和动物宿主施加的健康促进作用,因此被确定为必不可少的微生物。 这项研究是从尼日利亚的局部发酵的局部发酵牛奶产品的乳清中分离出的,它根据生理和生化特性来表征菌株,并使用16sRRNA测序识别它们。 无菌收集了总共32个样本,并在MRS和M17培养基上培养了乳清。 生理和生化结果表明,主要是杆和球形的分离生物包括革兰氏阳性和过氧化氢酶阴性物种。 生物体不仅可以在不同浓度的pH,温度和NaCl耐受和生长的能力上有所不同,而且能够独特地发酵十二种不同的糖。 随后使用PCR和序列分析通过分子技术筛选了获得的十种最理想的菌株。 关键词:Kindirmo,乳酸菌,发酵,乳清,益生菌。1,2 Oyeleke S.B.2,Abioye O.P.2和Bala J.D.2 1尼日利亚阿布贾的国家生物技术发展局食品与工业生物技术部,国家生物技术发展局。2尼日利亚尼日利亚州米纳市的联邦科技大学生命科学学院微生物学系,P.M.B 65。*通讯作者的电子邮件地址:nofisatoyedokun@gmail.com电话:+2348032471573摘要乳乳酸细菌(LAB)被确定为由于健康促进的影响,它们对人类和动物宿主施加的健康促进作用,因此被确定为必不可少的微生物。这项研究是从尼日利亚的局部发酵的局部发酵牛奶产品的乳清中分离出的,它根据生理和生化特性来表征菌株,并使用16sRRNA测序识别它们。无菌收集了总共32个样本,并在MRS和M17培养基上培养了乳清。生理和生化结果表明,主要是杆和球形的分离生物包括革兰氏阳性和过氧化氢酶阴性物种。生物体不仅可以在不同浓度的pH,温度和NaCl耐受和生长的能力上有所不同,而且能够独特地发酵十二种不同的糖。随后使用PCR和序列分析通过分子技术筛选了获得的十种最理想的菌株。关键词:Kindirmo,乳酸菌,发酵,乳清,益生菌。PCR结果表明,有98%的鉴定生物是保加利亚乳杆菌,乳杆菌乳杆菌,嗜酸乳杆菌,嗜热链球菌,嗜热链球菌,gasseri乳杆菌和lactobacillus plantarum。这些发现表明,Kindirmo可能是益生菌细菌的极好和潜在的来源,通常是益生菌的主要来源。建议进一步筛选和识别过程来确定菌株的功能,技术和益生菌特性。引言传统上已经在多种文化中生产和消费了不同类型的发酵食品,具体取决于地理位置的特殊性(Heinen等,2020)。由于乳酸细菌(LAB)表现出了压倒性的功能和技术特性,因此随着时间的流逝,它们一直是乳制品,制药和农业产业中大多数研究人员的关注主题。实验室已从动植物起源的众多发酵食品中分离出来,其营养和技术益处以及用作益生菌和功能性食品资源(Grajek等,2005; Chalat等,2011)。它们是革兰氏阳性,过氧化氢酶阴性的特殊且独特的群体,它们是仅产生乳酸细菌作为发酵最终产物的乳酸细菌的非孢子形成生物(Bassyouni等,2012)。本质上,牛奶被认为是实验室增殖的内在环境之一(Widyastuti和Febrisiantosa,2014年)。来自多种哺乳动物动物的牛奶已用于乳制品
生物肥料是微生物 - 阿古罗产品,含有促进植物生长,产量,土壤质量和疾病控制的微生物混合培养物。这项研究旨在隔离,鉴定和筛选具有生物肥料潜力以在农场中应用的微生物。土壤样品是从港口哈科特大学附近的农田和废物降落的土壤中收集的。使用营养琼脂,马铃薯葡萄糖琼脂,cetrimide琼脂和Ashby的琼脂分离并估算各种微生物。使用Pikovskaya培养基筛选了基于氮固定,钾和磷酸盐溶解化的生物肥料电位的微生物。从这项研究中获得的结果表明,Thefarmland土壤样品的总异亲性细菌和真菌计数为5.045±0.02和4.220±0.02 log 10 cfu/g,而废物垃圾场中的相应值分别为4.890±0.30±0.30±0.30和3.505±0.30 log 10 cfu 10 cfu/g/g/g/g。筛选后,具有生物肥胖剂电位的微生物被确定为尼日尔曲霉,chrysogenum,Cereus bacillus cereus,Lichenoriformis,Pseudomonas荧光症和azotobobacter Chroococcum。这项研究的发现表明,从农田土壤中分离出的微生物比在废物降落土壤中的氮固定和溶解不溶性不溶性钾和磷酸化合物更熟悉。这些微生物以可持续的方式显示了提高土壤生育能力和作物生产力的潜力。
鸡羽毛被认为是家禽行业的废产品,可以在环境中造成固体废物问题。角质酶有可能降解不溶性角蛋白,主要存在于羽毛,头发,角和蹄中。目前的研究的目的是隔离,筛选和鉴定羽毛废物倾倒部位的角蛋白细菌,并优化最大角质酶产生的培养条件,并随后羽毛降解。从印度泰米尔纳德邦Virudhunagar的羽毛废物倾倒现场分离出14种细菌,并被筛选为其角蛋白水解特性。相对,三种细菌表现出更好的角依性活性。基于形态学和生化特征和16S rRNA基因序列分析,分别被鉴定为licheniformis杆菌,谷氨酸杆菌菌Arilaitensis和Serratia marcescens。研究了温度,pH,羽毛浓度和各种底物对这些细菌生长参数的影响。所有细菌在40°C下的生长和蛋白质产生较高。B. licheniformis和S. marcescens在pH 8.5时产生了更多的蛋白质,而G. arilaitensis产生了更多的蛋白质,并在pH 8时生长良好。因此,使用鸡羽毛粉(1%)作为碳和氮来源,将三种细菌淹没发酵。中,AriLaitensis是降解羽毛的优越性,产生更多的蛋白质(2.15±0.04 mg/ ml)和氨基酸(0.498±0.019 µ g/ ml)。显微镜观察到的羽毛水解剂涂片表明,g。Arilaitensis降解了鸡羽毛的效率更高,相对其他两种细菌。
摘要:这项研究研究了与新鲜西红柿恶化相关的细菌和真菌(Lycopersicum esculentum)。从卡杜纳(Kaduna)Ungwan Rimi地区的四(4)个不同的零售店获得了16(16)个番茄样品。使用标准方案确定所选番茄样品的近端组成。使用浇注板法用于与番茄样品分离细菌和真菌。使用磁盘扩散技术确定了针对细菌和真菌分离株的选定抗生素和抗真菌药物的抗生素图。The results of proximate composition showed that sample A had a moisture content of 94.10 %, 0.74% of ash, 0.97 % of crude protein, 0.66 % of crude fat, 1.10 % crude fiber, and 2.43 % of carbohydrate while sample B showed similar percentage composition of 93.89 % of moisture content, 0.86 % of ash, 1.0 % of crude protein, 0.69 % of crude fat, 1.34%的粗纤维和2.22%的碳水化合物。分离和鉴定的细菌是金黄色葡萄球菌,大肠杆菌和沙门氏菌。最普遍的细菌分离株是金黄色葡萄球菌,其50%,而沙门氏菌和大肠杆菌的分离菌则分别为25%。真菌分离株是尼日尔曲霉和曲霉菌的青霉素。尼日尔曲霉最为普遍,而青霉人SP的占30.8%,而曲霉菌的患病率最少为15.4%。在不同浓度的抗生素下,大肠杆菌对庆大霉素和链霉素具有抗性,对氯霉素,Spafloxacin,ciproflofloxacin,amoxycillincillin,peffloxacin,peffloxacin,tarvid和agenmentine敏感。沙门氏菌SP的抗菌易感性表明,它耐庆大霉素,对链霉素和粘膜链霉素的敏感性适中,对氯霉素,替福洛沙星,ciprofloflofloxin,ciproflofloxin,Amoxycillin,amoxycillin,pefloboxacin,pefloxacin,tarvid和Audmentine consives Adimenty consivessine spectimity敏感。金黄色葡萄球菌对rocephin,Zinacef和链霉菌素具有抗性,对氨木酸和阿莫西林敏感,并且对斑岩蛋白,环丙沙星,源自源环霉素,pefloxacin和Erythromycin敏感。抗真菌敏感性在其针对测试真菌分离株的有效性方面显示出不同浓度的变化。这些真菌的存在以及能够引起食物中毒的细菌分离株引起了人们对公共卫生风险的关注,这些风险可能与消耗变质的新鲜西红柿有关。用清洁或氯化水进行适当的处理,运输和彻底洗涤,将降低与细菌和真菌物种相关的番茄变质的风险。
DNA提取自1869年弗里德里希·米舍(Friedrich Miescher)首次试图隔离它以来,它已经走了很长一段路,意外地发明了一种核酸隔离方法,后来其他人会完善。该过程涉及分解细胞膜和核信封以获得DNA,这对于PCR,DNA克隆,测序和电泳等各种分子生物学应用至关重要。取决于样本类型 - 需要植物,血液,细菌或其他 - 需要不同的提取方法,每种方法都有自己的手术,以确保DNA的所需纯度和数量。从苯酚 - 氯仿等醇到蛋白酶K,CTAB,自旋柱,磁珠等等,存在各种技术,每个技术都基于样品的特定要求选择。DNA提取的故事是连续的创新和精致之一,像Meselson和Stahl这样的先驱在1958年建立了全功能程序,而其他人则随着时间的推移贡献了他们的方法。从细胞中提取DNA的过程涉及三个主要步骤:细胞裂解,沉淀和溶解DNA。所使用的化学或组合的类型可能会根据目标和细胞类型而有所不同。对于柔软的细胞壁,如在结核分枝杆菌中发现的,用简单的裂解缓冲液加热是有效的。然而,较硬的细胞壁需要机械,化学和酶促方法来提取DNA。基于化学的DNA提取方法是基于溶液的,涉及各种有机和无机溶液。这些包括SDS,CTAB,苯酚,氯仿和硫氰酸鸟酯。所有程序的主要步骤是细胞裂解,降水和洗脱。基于溶液的(化学)DNA提取进一步分为基于有机溶剂的和基于无机溶剂的方法。有机溶剂(如苯酚和氯仿)以前已被使用,但由于危险而灰心。相反,采用了更安全的替代方案,例如Triton X100和EDTA。不同的化学物质有特定目的;蛋白酶K等酶分解蛋白质直接靶向氨基酸连接。DNA提取过程的有效性可能受细胞类型的影响以及某些化合物或化学物质组合的使用。在冷链中,尽管有一些缺点,但基于蛋白酶K的DNA分离方法还是有效的方法。此过程的一个问题是酶的稳定性降低,随着时间的流逝而降低。使用无机溶液(例如氯化钠和乙酸钾)与蛋白酶K结合使用的盐溶液。但是,提取的DNA的纯度可能是一个问题,因为尽管获得了足够的质量,但收益率可能不会令人满意。苯酚 - 氯仿 - 异氧化酒精法(PCI)是提取DNA的另一种流行技术。它使用液化缓冲液,苯酚和氯仿对蛋白质和破坏细胞,从而产生出色的产率和纯度。可以通过使用现成的DNA提取缓冲区来修改此方法,从而快速而简单。高质量的DNA产量和简单操作系统对于准确的DNA分析至关重要。相反,基于二氧化硅的DNA提取方法提供了一种独特的方法,依赖于二氧化硅和DNA相互作用的独特化学。带正电荷的二氧化硅颗粒在离心过程中与带负电荷的DNA结合,从而允许高质量的DNA产量和易于操作。由于其简单性和有效性,该市售技术已在诊断实验室中被广泛接受。为了验证提取的DNA,可以使用溴化乙锭或其他与DNA在UV光下反应的荧光染料在琼脂糖凝胶上电泳。通过计算260 nm和280 nm波长的吸光度来测量DNA的纯度。确定DNA纯度的最常见方法是A260/A280比率,对于优质DNA,应在1.7-2.0之间。较低的比率表明存在更多的污染物。荧光测量是确定DNA产量和浓度的另一种流行方法,它由于其广泛的可用性和比吸光度方法更高的灵敏度。也可以使用二苯胺(DPA)指示器确认DNA的存在,该指标涉及DNA化学水解。与分光光度计在600 nm处的吸光度强度也可以通过将DNA浓度与已知DNA浓度的标准曲线进行比较来确定DNA浓度。已开发和应用多种用于DNA提取的方法,包括用于传染病的护理核酸测试和人类DNA提取方法。方法的选择取决于DNA的特定应用和所需的质量。
图1。有效的宿主基因组DNA去除,而无需降低噬菌体DNA产量。 使用Norgen的噬菌体DNA分离试剂盒从四个富集的噬菌体培养物中分离总DNA。 在添加提供的裂解之前,进行了DNase I预处理。 布里液,将20单位的DNase I添加到1 ml富集的噬菌体培养物中,并将混合物在室温下孵育20分钟。 DNAase I处理后,遵循该过程。 作为对照,使用Norgen的噬菌体DNA分离试剂盒从相同4个培养物的等分试样中分离DNA,而无需进行DNase I处理。 进行DNA分析,将10 µL的每50 µL洗脱加载到1x TAE琼脂糖凝胶上。 可以看出,噬菌体DNA被其外套蛋白安全地保护了DNase I治疗,而宿主基因组DNA则被DNase I有效降解。 因此,DNase I预处理导致最终噬菌体洗脱中的宿主GDNA污染较少,而不会影响总噬菌体DNA产量。 车道M是Norgen的Highranger 1 Kb DNA梯子(Cat。 11900)。有效的宿主基因组DNA去除,而无需降低噬菌体DNA产量。使用Norgen的噬菌体DNA分离试剂盒从四个富集的噬菌体培养物中分离总DNA。在添加提供的裂解之前,进行了DNase I预处理。布里液,将20单位的DNase I添加到1 ml富集的噬菌体培养物中,并将混合物在室温下孵育20分钟。DNAase I处理后,遵循该过程。作为对照,使用Norgen的噬菌体DNA分离试剂盒从相同4个培养物的等分试样中分离DNA,而无需进行DNase I处理。进行DNA分析,将10 µL的每50 µL洗脱加载到1x TAE琼脂糖凝胶上。可以看出,噬菌体DNA被其外套蛋白安全地保护了DNase I治疗,而宿主基因组DNA则被DNase I有效降解。因此,DNase I预处理导致最终噬菌体洗脱中的宿主GDNA污染较少,而不会影响总噬菌体DNA产量。车道M是Norgen的Highranger 1 Kb DNA梯子(Cat。11900)。