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寡脱氧核苷酸的杂交特性已经以多种技术为特征(1-4)。在适当条件下,寡核苷酸与DNA中的特定位点杂交(4,5)。此外,可以将完美的碱基配对的核苷酸双链体与包含单个不匹配的碱基对(4-6)的复式区分开。我们利用寡核苷酸的杂交特性在开发一种分离特定克隆的DNA序列的方法中(5)。我们的一般方法是化学合成寡核苷酸的混合物,这些寡核苷酸代表给定蛋白的一小部分氨基酸序列的所有可能的密码子组合。在该混合物中必须是与蛋白质该部分编码的DNA相结合的一个序列。这种互补的寡核苷酸将与来自蛋白质的编码区域的DNA形成完美的基础复式,而混合物中的其他寡核苷酸将形成不匹配的双链体。在严格的杂交结合下,只有完美匹配的双链体将形成,从而允许将寡核苷酸的混合物用作特定的杂交探针。混合序列寡核苷酸探针应允许分离出已知氨基酸序列的任何蛋白质的克隆DNA序列。我们已将这种方法应用于人A2-微球蛋白(AM)的克隆cDNA序列的分离。AM是一种从尿液中分离出来的小蛋白(分子量11,800)。随后,发现A3〜m与主要组织相容性基因座的细胞表面抗原相关(8、9)。A2M的确切功能尚不清楚,尽管最近的证据表明该分子可以稳定辅助蛋白的三级结构(10)。氨基酸序列已从包括人类在内的四个物种中定位为F2M(11)。我们已经使用氨基酸序列来设计探针,以分离到人类2M的克隆cDNA。

人类P2

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