开发高产营养水稻是缓解发展中国家微量营养素缺乏问题,特别是涉及锌和铁 (Fe) 缺乏的人类营养不良问题,并实现更好应用的一种方法。Fe 和 Zn 等微量营养素的运输主要通过烟胺合酶 (OsNAS) 基因家族调控,而产量是一种涉及多个基因座的复杂性状。通过 CRISPR (成簇的规律间隔的短回文重复序列)-Cas9 进行基因组编辑,重点关注 OsNAS2 启动子,特别是删除位置 -933 处的顺式调控元件 ARR1AT,以增强籽粒和单株植物中 Zn 的积累。结果表明,我们的启动子编辑增加了单株植物的 Zn 浓度。证据还表明,每个主穗的小穗数量增加可导致单株籽粒增加。这些性状在“无转基因”和纯合植物后代中遗传。需要进行进一步研究来验证田间条件下的性状表现并阐明小穗增加的原因。
摘要随着细胞在有丝分裂过程中复制其DNA,由于DNA复制过程的固有局限性,端粒缩短了。维持端粒长度对于癌细胞克服端粒缩短引起的细胞衰老至关重要。端粒酶逆转录酶(TERT)是端粒酶的限速催化亚基,端粒酶是RNA依赖性的DNA聚合酶,可延长端粒DNA以维持端粒稳态。tert启动子突变。此外,TERT启动子高甲基化也会导致TERT转录增加,已在dend依膜瘤和小儿脑肿瘤中使用。在高度癌症的气氛中观察到的TERT失调的高频使端粒酶活性成为开发新型疗法的有吸引力的靶标。在这篇综述中,我们简要讨论正常人类细胞中TERT的正常端粒生物学以及TERT的结构,功能和调节。我们还强调了TERT在癌症生物学中的作用,重点是原发性中枢神经系统肿瘤。最后,我们总结了TERT启动子突变在癌症中的临床意义,这些突变促进造成肿瘤的分子机制以及针对TERT的癌症疗法的最新进展。
合成了具有最高预测效力的构建体并在 HEK293T 细胞中进行了测试。第一代的结果表明,大多数增强子+启动子构建体的性能与母体 C6 启动子一样好或更好。特别是,构建体 C120 和 C124 分别表现出约 30% 和约 40% 的提高效力。同样,一些点突变导致性能提高 10% 到 30%。超突变构建体(采用迭代或贪婪方法)破坏了 HEK293T 细胞中的启动子活性。根据第一代的结果,我们合理地设计了一组新的构建体,这些构建体基于体外表达最高的构建体的组合。第二代在 HEK293T 细胞中进行了测试,所有构建体都表现出比亲本 C6 更高的表达。特别是,与原始 C6 构建体相比,构建体 C187 达到了约 2 倍的改善。
SQUAMOSA 启动子结合样 (SPL) 蛋白构成了一个转录因子大家族,已知它们在生长和发育过程中起着关键作用,包括幼年到成年和营养期到生殖期的转变。这使得 SPL 成为烟草属植物精准育种的有趣靶标,例如用作重组生物工厂。我们报告了在烟草品种 K326 中鉴定出的 49 个 SPL 基因和在本氏烟草 LAB 菌株中鉴定出的 43 个 SPL 基因,根据拟南芥中的 SPL 分类,它们被分为八个系统发育组。外显子-内含子基因结构和 DNA 结合域在同源物和直系同源物之间高度保守。我们发现 30 个 NbSPL 基因和 33 个 NtSPL 基因可能是 microRNA 156 的靶标。通过 RNA-seq 分析了叶片中 SPL 基因的表达,发现不受 miR156 控制的基因通常以高水平组成性表达,而 miR156 调控的基因则表现出较低的表达,通常是发育调控的。我们选择了 N. benthamiana SPL13_1a 基因作为 CRISPR/Cas9 敲除实验的靶标。我们在此表明,完全敲除该单个基因会导致开花时间显著延迟,这一特性可用于增加重组蛋白生产的生物量。
索具:卡斯珀活动中心的天花板采用完全裸露的铁桁架和单层走道系统。天花板到地板的高度为 87.6 英尺,索具的可能性几乎是无限的。对于满座音乐会,竞技场东端的网格标准重量限制为 32,000 磅。*对于剧院和半场音乐会表演,中心网格允许悬挂多达 12,000 磅*。对于剧院表演,电动绞盘系统可提供多达 15 组线组,每组可承受高达 1,000 磅的重量。 *这些重量能力是标准的。根据建筑物的积雪量,最多可悬挂 100,000 磅。超过 32,000 磅的重量必须得到城市工程师的批准。照明:一般:竞技场照明由六 (6) 个不可调光电路上的 108 个 1KW 汞蒸气灯和 16 个 1KW 白炽灯提供。竞技场地板上方的亮度可达到 90 英尺烛光。在竞技场地板上方第 35 排,亮度降低到 40 英尺烛光。色温约为 4,400 ° 开尔文。剧场照明:提供适度的剧场照明套件,包括以下设备:
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它们的活性如何结合起来控制 RNA 表达仍不清楚。在这里,我们设计了一种高通量报告基因检测方法,称为 ExP STARR-seq(增强子 x 启动子自转录活性调控区测序),并用它来检查人类 K562 细胞中 1,000 个增强子和 1,000 个启动子序列的组合兼容性。我们确定了增强子-启动子兼容性的简单规则:大多数增强子以相似的量激活所有启动子,并且内在增强子和启动子活性相乘地结合起来决定 RNA 输出(R 2 =0.82)。此外,两类增强子和启动子显示出微妙的优先效应。管家基因的启动子含有内置的激活基序,例如 GABPA 和 YY1 等因子,这降低了启动子对远端增强子的反应性。可变表达基因的启动子缺乏这些基序,对增强子表现出更强的反应性。总之,对增强子-启动子兼容性的系统评估表明,通过增强子和启动子类别调整的乘法模型可以控制人类基因组中的基因转录。
和缺失分别以+和-表示。i 使用酶StuI对T0纯合突变体进行限制性消化筛选。野生型Solanum etuberosum产生消化的PCR带(蓝色箭头),而突变植物产生对StuI消化有抗性的PCR带。J、k CR-SeSP5G突变体在短日照条件下开花,而野生型在短日照条件下不能开花。比例尺:1厘米;NF,无花。