SQUAMOSA 启动子结合样 (SPL) 蛋白构成了一个转录因子大家族,已知它们在生长和发育过程中起着关键作用,包括幼年到成年和营养期到生殖期的转变。这使得 SPL 成为烟草属植物精准育种的有趣靶标,例如用作重组生物工厂。我们报告了在烟草品种 K326 中鉴定出的 49 个 SPL 基因和在本氏烟草 LAB 菌株中鉴定出的 43 个 SPL 基因,根据拟南芥中的 SPL 分类,它们被分为八个系统发育组。外显子-内含子基因结构和 DNA 结合域在同源物和直系同源物之间高度保守。我们发现 30 个 NbSPL 基因和 33 个 NtSPL 基因可能是 microRNA 156 的靶标。通过 RNA-seq 分析了叶片中 SPL 基因的表达,发现不受 miR156 控制的基因通常以高水平组成性表达,而 miR156 调控的基因则表现出较低的表达,通常是发育调控的。我们选择了 N. benthamiana SPL13_1a 基因作为 CRISPR/Cas9 敲除实验的靶标。我们在此表明,完全敲除该单个基因会导致开花时间显著延迟,这一特性可用于增加重组蛋白生产的生物量。