摘要:基因组步行经常被应用于分子生物学和相关领域。在此提出了一种简单但可靠的基因组步行技术,称为半位点特异性引物PCR(3SP-PCR)。3SP-PCR的键是在次级PCR中使用半位点特异性引物,该引物部分重叠了其相应的主要位点特异性引物。3sp-PCR组包括两轮嵌套的放大反应。在每一轮反应中,任何底漆仅在单个放松静态周期中仅在DNA模板中部分退火,从而形成一组单链DNA。靶标单链DNA可以转换为由位点特异性引物指向的双链分子,因此可以通过随后的高差异周期进行指数分化。由于缺乏与任何底漆的完美结合位点,因此无法将非目标转换为双链,因此无法扩增。我们通过使用它来探测水稻湿霉素基因的未知DNA区和左旋乳杆菌CD0817谷氨酸脱羧酶基因的未知DNA区域。
摘要在本文中介绍了CMOS操作放大器的新型常数G轨道轨道输入阶段。输入阶段主要由PMOS晶体管差异和nmos晶体管差为差异对,并平行地放置为轨道到轨道差异输入阶段,并且两个差异对的尾电流分别由PMOS和NMOS普通型Voltimode Voltigage Voltecor控制。操作放大器的输入阶段的G M可以是输入共同模式电压内的恒定值。模拟结果表明,当电源电压分别为1.8 V和3.3 V时,整个输入范围(0〜1.8 V或0〜3.3 V)的G M变化在±1之内。38%和±3。38%。功率耗散为36.9 µW,51.74 µ W. SMIC 55 nm CMOS工艺和Cadence Specter Simulator用于布局和模拟这项工作。关键字:轨道轨道,常数G M,操作放大器,共同模式范围,低压分类:集成电路(内存,逻辑,模拟,RF,传感器)
放大拟合取决于扩增子的序列(Kozarewa等人,2009年),反过来决定通过自我宣布的抑制程度(Acinas等人,2005年)。在实践中,如果一个序列比另一个序列增加20%,则在30轮放大后将是237(1.20 30)倍。按定义,PCR将产生相同的起始材料副本。但是,这些副本并不代表成绩单的原始丰度;我们将它们称为重复。这些不是我们目标的“真实副本”,删除或承认它们符合我们的最大利益。PCR重复可以通过其映射坐标来识别计算。然而,已经表明,重复项的计算去除量低估了转录本的丰度,特别是那些短或高度表达的转录本(Fu Y.等,2018)。一个基因可以被错误地识别为低调的表达,因为我们在试图消除PCR重复的同时部分去除了其真实副本。因此,除去仅依赖其坐标的重复物可能会对下游分析产生负面影响。
摘要:c-MET 原癌基因 (MET) 在肺癌发生中起着重要作用,影响癌细胞的存活、生长和侵袭性。非小细胞肺癌 (NSCLC) 中的 MET 受体是潜在的治疗靶点。高输出下一代测序技术的发展使得能够更好地识别 MET 通路中的异常,例如 MET 外显子 14 (METex14) 突变。此外,对表皮生长因子受体 (EGFR) 和酪氨酸激酶抑制剂 (TKI) 耐药机制的分析表明,MET 扩增作为 TKI 治疗的 EGFR 突变 NSCLC 患者的逃逸机制的重要性。本综述总结了关于 MET 及其异常的实验室发现、非 EGFR 突变 NSCLC 中 METex14 变异和 MET 扩增的试验结果以及 EGFR 突变 NSCLC 中对 TKI 的获得性耐药性。首次使用抗 MET 药物对非选择性 NSCLC 患者或因 MET 过表达而选择性的患者进行试验的结果令人失望。目前,两种情况似乎是使用抗 MET 药物治疗这些患者最有希望的情况:携带 METex14 的肿瘤和在 TKI-EGFR 下发生突变的 EGFR 敏感突变,具有 MET 扩增耐药机制或 EGFR 耐药突变。关键词:非小细胞肺癌,MET 外显子 14,MET 扩增,MET 通路
摘要:针对传统qPCR仪器体积大、价格昂贵、携带不便等问题,本文报道了一种便携式旋转式实时荧光PCR(聚合酶链式反应),可在现场完成DNA的PCR扩增,并可实时观察反应过程。通过对目的基因pGEM-3Zf(+)的分析,将梯度扩增曲线和熔解曲线与商用设备进行对比,结果证实了本装置的稳定性。这是首次利用机械旋转结构实现与商用仪器相媲美的梯度扩增曲线和熔解曲线。本系统平均功耗约为7.6 W,是分流PCR实时荧光定量中能耗最低的,且自带锂电池供电,可现场使用。此外,由于通过机械位移控制系统取代了传统的TEC(热电致冷器)控温,整套设备成本仅约710美元,远低于商用PCR仪成本,且设备技术门槛低,可适应非专业场合,重复性强。
摘要:SiGe BiCMOS 技术可用于生产超快、低功耗硅像素传感器,即使没有内部增益机制,也能提供最先进的时间分辨率。开发此类传感器需要确定可能降低计时性能的主要因素,并表征传感器时间分辨率对放大器功耗的依赖性。使用 IHP Microelectronics 公司采用 SG13G2 技术生产的原型传感器的 90 Sr 源进行测量,结果显示,在放大器电流为 7 µA 时,时间分辨率为 140 ps,在更高功耗时,时间分辨率为 45 ps。完整模拟表明,用于校正时间游动的信号超阈值时间测量分辨率是影响计时性能的主要因素。
摘要:SIGE BICMOS技术可用于生产超快速的低功率硅像素传感器,即使没有内部增益也可以提供最新的时间分辨率。此类传感器的开发需要识别和控制主要因素,这些因素可能会降低正时性能以及传感器时间分辨率对放大功率消耗的依赖性的表征。IHP微电子学中SG13G2技术在SG13G2技术中产生的原型传感器的90 SR源的测量表明,在7μA的放大电流下,在150μpS的放大电流下的时间分辨率为145 ps,功率为150μA。用于校正时间步行的信号时阈值测量的分辨率是影响该原型的时机性能的主要因素。
摘要:SIGE BICMOS技术可用于生产超快速的低功率硅像素传感器,即使没有内部增益也可以提供最新的时间分辨率。此类传感器的开发需要识别和控制主要因素,这些因素可能会降低正时性能以及传感器时间分辨率对放大功率消耗的依赖性的表征。用IHP微电子学中SG13G2技术产生的原型传感器的90 SR源的测量结果显示,在7 µA的放大电流下,在150 µA的功率消耗下的放大电流时的时间分辨率为140 ps。用于校正时间步行的信号时阈值测量的分辨率是影响该原型的时机性能的主要因素。
摘要:随着分子检测从诊断实验室转移到现场检测变得越来越普遍,对基于核酸的诊断工具的需求突然增加,这些工具具有选择性、灵敏度、对地形变化的灵活性,并且具有成本效益,可以协助即时诊断系统进行大规模筛查,并在疫情爆发和大流行时在偏远地区使用。基于 CRISPR 的生物传感器是一种很有前途的核酸检测新方法,该方法使用 Cas 效应蛋白(Cas9、Cas12 和 Cas13)作为极其专业的识别组件,可与各种读出方法(如荧光、比色法、电位法、横向流动测定等)结合使用,进行现场分析。在本综述中,我们介绍了将 CRISPR Cas 系统与传统生物传感读出方法和扩增技术(如聚合酶链式反应 (PCR)、环介导等温扩增 (LAMP) 和重组酶聚合酶扩增 (RPA))相结合的一些技术方面,并继续阐述所开发的生物传感器在检测一些主要病毒和细菌疾病方面的前景。在本文的范围内,我们还讨论了最近的 COVID 大流行以及自其问世以来经过开发的众多 CRISPR 生物传感器。最后,我们讨论了 CRISPR Cas 系统在即时检测中的一些挑战和未来前景。
摘要:使用抗性品种是控制由真菌 Hemileia vastatrix 引起的咖啡叶锈病的最有效策略。为了协助开发此类品种,与咖啡抗性小种 I 和 II 以及 H. vastatrix 的致病型 001 的两个基因座相关的扩增片段长度多态性 (AFLP) 标记被转换为序列特征扩增区 (SCAR) 和切割扩增多态性位点 (CAPS) 标记。总共在抗性和易感亲本以及来自 F 2 群体的 247 个个体中验证了 2 个 SCAR 标记和 1 个 CAPS 标记。在使用开发的标记进行基因分型并使用 H. vastatrix 小种 II 进行表型分析的 F 2:3 和回交 (BCrs 2 ) 群体中评估了这些标记对标记辅助选择 (MAS) 的效率。这些标记在 MAS 中显示出 90% 的效率。因此,开发的标记与与其他抗锈病基因相关的分子标记一起用于 F 3:4 和 BCrs 3 咖啡选择。使用与咖啡浆果病 (CBD) 抗性相关的两个标记分析选定的植物,旨在进行预防性育种。具有所有抗性位点的 F 3:4 和 BCrs 3 个体的 MAS 是可行的。我们的表型和基因型方法可用于开发具有多种基因的咖啡基因型,这些基因赋予咖啡叶锈病和 CBD 抗性。