条件 CGRIC 正在葡萄栽培和酿酒学统一拨款管理网站内合作,该网站包括以下商品团体和资助机构,以最大限度地利用可用的研究资金:美国葡萄园基金会 (AVF)、加州葡萄砧木研究基金会和俄勒冈州葡萄酒委员会 (OWB)。所有指定团体的代表一直在共同努力,以简化研究提案的提交和审查流程。请在 http://uvegrants.ucdavis.edu 在线提交您的提案。如果您有任何问题,请拨打 916/441-2031 联系 CGRIC。
代谢工程和合成生物学方法已经繁荣了生物技术领域,其中主要重点是大肠杆菌和酿酒酵母作为微生物的工作试验。在近年来,作为生产宿主的革兰氏阳性细菌乳酸菌和枯草芽孢杆菌的注意力越来越多。本评论将证明这些细菌可以设计的不同水平及其各种应用可能性。例如,工程化的乳酸乳杆菌菌株对生物医学应用显示出巨大的希望。此外,我们还提供了最新的合成生物学工具的概述,这些工具促进了这两种微生物的使用。
工业微生物学乙醇的产生:乙醇(乙醇)Ch 3 Ch 2 OH可以通过合成化学方法或发酵产生。乙醇(也称为生物乙醇)是通过富含葡萄糖或蔗糖培养基的发酵产生的,在没有氧气的情况下,酒精的产生最佳。最常见的乙烯类微生物是酵母菌,其中包括酿酒酵母,Schizosacachomyces spp。,Candida spp。,Kluyveromyces Lactis,Pichia spp。,Pichia spp。细菌,例如Mobilis,梭状芽孢杆菌和leuconostoc mesenteroides也参与了酒精发酵。参与这些酒精发酵的酵母主要是酿酒酵母的菌株,不能直接发酵淀粉。使用乙醇(1)用作化学饲料库存:在化学工业中,乙醇在许多化学过程中都是中间体。(2)溶剂使用:乙醇在行业中广泛用作染料,油,蜡,化妆品等的溶剂等。(3)一般公用事业:酒精被用作医院中的消毒剂,在家中进行清洁和照明,在实验室中,仅次于水作为溶剂。(4)燃料:乙醇与高达10%的汽油或汽油混合,被称为Gasohol。乙醇产生的生物化学该过程从糖通过糖甲酸糖(EMP)途径(EMP)途径开始,然后在厌氧条件下通过丙酮酸型脱羧酶在厌氧条件下转化为乙醛。乙醛进一步释放了两个分子的二氧化碳,并通过酒精脱氢酶形成乙醇。
酵母基因组删除项目 (SGDP) 使用五株源自酿酒酵母 S288C 的 Dharmacon 酵母敲除 YKO 亲本菌株,生成了一套几乎完整的酵母开放阅读框 (ORF) 敲除。1 使用基于 PCR 的策略将每个 ORF 替换为 KanMX 盒,该盒包含每个删除的独特标签“条形码”。生成了四个不同的突变体集合:交配类型 MATa 和 MATalpha 的单倍体、非必需基因的纯合二倍体和包含必需和非必需 ORF 的杂合二倍体。存储:
结果,获得的葡萄酒的酒精含量较高,酸性较低,有时较重,有时不那么强烈 - 与市场期望完全不一致。如果我们要了解危及的问题并提出适当的解决方案,将这些感官属性转化为Oenologologicy术语至关重要。可饮用性是用来描述一种易于消费者享用的红酒的术语。对于酿酒师来说,这意味着要仔细考虑浸渍行程(热镀锌与传统浸渍),并在单宁蛋白上工作以控制口感参数,例如结构和涩味。这也是构成香气并控制什么可以掩盖它们的问题。
摘要:本研究研究了两株粟酒裂殖酵母菌株(NCAIM Y01474 T 和 SBPS)和两株日本裂殖酵母菌株(DBVPG 6274 T、M23B)发酵苹果汁的能力,并与酿酒酵母 EC1118 进行了比较,以了解它们对苹果酒挥发性化合物的影响。裂殖酵母的乙醇耐受性和脱酸能力使其成为常用酿酒酵母发酵剂的潜在替代品。尽管时间过程不同(10-30 天),但所有菌株均可完成发酵过程,裂殖酵母菌株降低了苹果汁中的苹果酸浓度。结果表明,每种酵母对苹果酒的挥发性成分都有不同的影响,使用主成分分析可以分离最终产品。苹果酒的挥发性成分在醇、酯和脂肪酸的浓度方面表现出显著差异。具体来说,絮凝剂菌株 S. japonicus M23B 增加了乙酸乙酯(315.44 ± 73.07 mg/L)、乙酸异戊酯(5.99 ± 0.13 mg/L)和异戊醇(24.77 ± 15.19 mg/L)的含量,而 DBVPG 6274 T 使苯乙醇和甲硫醇的含量分别增加到 6.19 ± 0.51 mg/L 和 3.72 ± 0.71 mg/L。在 S. cerevisiae EC1118 发酵的苹果酒中检测到大量萜烯和乙酯(例如辛酸乙酯)的产生。这项研究首次证明了 S. japonicus 在苹果酒酿造中的应用可能性,可以为产品提供独特的芳香味”。
摘要:由于其复杂性,CRISPR/Cas 系统已成为广泛使用的酵母基因组编辑方法。然而,CRISPR 方法通常依赖于预组装的 DNA 和额外的克隆步骤来传递 gRNA、Cas 蛋白和供体 DNA。这些繁琐的步骤可能会阻碍其实用性。在这里,我们提出了一种替代方法,即组装和 CRISPR 靶向体内编辑 (ACtivE),该方法仅依赖于线性 DNA 片段的体内组装来构建质粒和供体 DNA。因此,根据用户的需要,可以从存储库中轻松选择和组合这些部分,作为快速基因组编辑的工具包,无需任何昂贵的试剂。该工具包包含经过验证的线性 DNA 片段,易于在室温下存储、共享和运输,大大降低了昂贵的运输成本和组装时间。优化该技术后,还对酵母基因组中靠近自主复制序列 (ARS) 的八个基因座进行了整合和基因表达效率表征,以及这些区域的破坏对细胞适应性的影响。通过构建 β-胡萝卜素途径展示了 ACtivE 的灵活性和多路复用能力。在短短几天内,在酿酒酵母 BY4741 上从头开始实现了单基因整合效率 >80% 和三重整合效率 >50%,无需使用体外 DNA 组装方法、限制性酶或额外的克隆步骤。本研究提出了一种可轻松用于加速酵母基因组工程的标准化方法,并为酵母合成生物学和代谢工程目的提供了明确的基因组位置替代方案。关键词:酿酒酵母、CRISPR 工具包、基因组编辑、合成生物学、标准化、基因座表征■简介
随着包括多重基因组工程在内的合成生物学工具的生物技术应用迅速扩展,构建战略性设计的酵母细胞工厂变得越来越可能。这在很大程度上要归功于 CRISPR/Cas 技术和高通量组学工具等基因组编辑方法的最新进展。模型生物面包酵母 ( 酿酒酵母 ) 是生产高价值代谢物的重要合成生物学基础。多重基因组工程方法可以加快酵母细胞工厂中有效异源途径的构建和微调。最近出现了许多利用这一点的多重基因组编辑技术。本综述重点介绍此类工具的最新进展,例如 delta 整合和 rDNA 簇整合与 CRISPR-Cas 工具相结合,可大大提高多重整合效率。还回顾了作为多拷贝基因整合创新替代方法的预置门系统的例子。除了多重整合研究之外,还讨论了替代基因组编辑方法的多重化。最后,我们讨论了涉及非常规酵母的多重基因组编辑研究以及自动化对于高效细胞工厂设计和构建的重要性。将 CRISPR/Cas 系统与传统酵母多重基因组整合或供体 DNA 递送方法相结合,可通过提高效率和准确性来加快菌株开发。诸如在基因组中预先放置合成序列等新方法以及改进的生物信息学工具和自动化技术有可能进一步简化菌株开发过程。此外,讨论的用于改造酿酒酵母的技术可以适用于其他工业上重要的酵母物种,以进行细胞工厂开发。
除了其生态贡献外,真菌在医学中也很重要,它们已经使用了几个世纪。真菌物种,例如青霉和曲霉菌,一直是关键抗生素和其他治疗剂的来源,彻底改变了现代医学。除了在医疗保健中的使用之外,真菌在诸如粮食生产之类的行业中至关重要,它们被用来发酵面包,奶酪,啤酒和葡萄酒。真菌(例如酿酒酵母)被广泛用于烘烤和酿造,因为它们能够将糖转化为酒精和二氧化碳。此外,真菌在生物修复中发挥作用,在那里它们分解了环境污染物,包括漏油和重金属,并将其转化为无害的物质。