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新的靶点空间 通过靶向 mRNA 来调节蛋白质表达已经是药物开发中一种经过验证的方法,如基于 RNAi 的疗法所示。然而,这些药物不是小分子,这严重限制了它们作为治疗策略的使用。用小分子靶向 mRNA 二级结构是一个新兴领域,但用小分子结合 mRNA 的治疗效果尚未得到验证。此外,这种方法无法实现组织选择性,因为此类药物会与目标 mRNA 在其表达的任何地方结合。Slonim 解释说,他的团队已经开发了一个使用荧光标记的转移 RNA (tRNA) 的高内涵筛选平台。tRNA 通过将特定氨基酸按照 mRNA 上的代码运输到将氨基酸链接到蛋白质的核糖体中发挥重要作用。“我们的想法是将荧光颜色附着在 tRNA 上,并将其转染到细胞中。当一对标记的 tRNA 最终位于核糖体上时,它会产生 FRET 信号,使我们能够实时看到蛋白质翻译的光,”他说。为了实现这一目标,该团队纯化并用荧光标签标记了人类所有 tRNA(46 种同工受体)(图 1)。他们设计了两个完整的 tRNA 库:一个标记有能量供体,另一个标记有能量受体(红色和绿色)。“这是产生 FRET 信号的绝佳机会。核糖体将两个 tRNA 放在一起,卸下氨基酸并构建蛋白质链。这是一个可重复的事件,发生在每个核糖体、每个细胞中——它可能是自然界中存在的最可重复的事件。我们可以在看起来像夜晚银河系的图像中看到这一现象,”他说。

看到曙光——实时可视化蛋白质翻译

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