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为了将PE2变体的活性与野生型PE2的活性进行比较，我们设计了PEGRNA，它可以针对35个基因组基因座NGN PAM。PEGRNA建议使用引物结合位点（PBS）和RT模板（13 NT PBS和11〜14 NT RT模板）的长度，并经过随机设计以在目标基因组基因座中安装插入，缺失和取代。我们使用单链DNA组装方法8（补充注释1）更有效地构造了PegrNA。使用这些PEGRNA，我们检查了HEK293T细胞中六种PE2变体和野生型PE2的主要编辑活性（图1A-C和补充表1）。正如预期的那样，野生型PE2主要在NGG PAM站点（在9个站点中的7个活性，在UBE3A-3+5G> C位点上活跃，高达23.8％，在NGA PAM站点上有一定的认可（在9个地点的4个地点，最高22.9％的ATC and cut）和公共ng> c> c> c> c> c> c> c> c> c> c> c> c> c> c> （在8个站点中的0个中活跃）或NGT位点（在9个站点中的0个位置活跃）。相反，PE2-NG，PE2-SPG和PE2-SPRY变体可以编辑NGN位点（PE2-NG：在34个站点中的24个，PE2-SPG中有效，PE2-SPG：在35个站点中的26个站点中活跃，PE2-SPRY，PE2-SPRY：活动中的24个站点中的24个站点中的24个站点）。与先前的研究6，PE2-NG变体相比，NGC PAM位点的活性相对较低，与NGD相比（其中D是A，G或T）PAM位点，并且与其他PE2变体相比，PE2-SPG变体在NGH处显示出最高的活性（其中H是A，C，C，T）PEAM位点（其中PE2）在其他PE2变体中（Fige2 variant）（FIGINIANT（FIGINIANT）（FIGINIANT（FIGINING）（FIGINIANT（FIGINID）（FIGINIANT（FIGINID）（FIGINIANT（FIGINID）（FIGINIANT（FIGINID）（图。1C和补充图1）。
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