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为了更好地了解Truecut Hifi Cas9的高保真度,我们评估了HEK293基因组中的其他基因。使用TEG-Seq进行了更多全基因组筛查,以检测HEK1,HEK4,VEG1和VEG3基因中的靶标。数据表明,Truecut Hifi Cas9比WT-CAS9和供应商I高保真CAS9蛋白产生的脱离目标较少(图1)。将每个编辑位点的脱靶编辑百分比与靶向编辑的百分比进行了比较,以确定相应站点的脱靶/靶向概率比。每个编辑事件均与其概率比(图1A)绘制,并根据概率将OFF目标的总数分组(图1B)。结果表明,与WT-CAS9和供应商I高保真CAS9相比,Truecut Hifi Cas9产生的脱靶编辑明显少得多。truecut hifi cas9只有一个非目标编辑的概率> 10%。相比之下,WT-CAS9和供应商I高保真CAS9分别具有16和6折叠目标(图1B)。

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