Monarch 组织 HMW DNA 提取试剂盒提供了一种快速可靠的方法,可从各种组织和细菌以及其他样本类型(包括酵母、昆虫和两栖动物)中提取高分子量 (HMW)、完整的基因组 DNA。优化的组织提取方案利用杵均质化和蛋白酶 K 消化并搅拌以裂解样品,然后进行蛋白质去除步骤并将提取的 DNA 沉淀到大玻璃珠的表面上。稍微修改的细菌提取方案利用溶菌酶在蛋白酶 K 消化之前有效裂解细菌细胞壁。对于标准方案,DNA 大小范围为 50 – ≥ 500 kb,可以调整以产生更长的 DNA,使其达到 Mb 范围,适用于软器官组织和细菌。纯化的 DNA 产量高,纯度极佳,几乎完全去除了 RNA。对于组织和细菌,处理时间约为 90 分钟。组织和细菌的纯度比通常为 1.8-1.9 (A 260 /A 280 ) 和 2.1-2.5 (A 260 /A 230 )。纯化的 HMW gDNA 适用于各种下游应用,包括长读测序 (Oxford Nanopore Technologies ® 和 Pacific Biosciences ® )、光学映射 (Bionano Genomics ® ) 和链接读基因组组装 (10X Genomics ® )。