摘要:已经开发了基于诱导多能干细胞(IPSC)衍生的运动神经元(MN)的大量体外模型,以研究运动神经元疾病(MNDS)选择性MN变性的潜在原因。例如,球体是简单的3D模型,具有大量生成的潜力,可以在不同的测定中使用。在这项研究中,我们生成了MN球体,并开发了一种工作流以分析它们。开始,通过开发管道来获得其大小和形状的测量,可以实现球体的形态学填充。接下来,我们分别通过QPCR和组织清除样品的免疫细胞化学来确认不同Mn标记在转录本和蛋白质水平上的表达。最后,我们评估了Mn球体使用微电极阵列方法以动作电位和突发形式显示功能活动的能力。尽管大多数细胞都表现出MN身份,但我们还表征了其他细胞类型的存在,即中间神经元和少突胶质细胞,它们与MN共享相同的神经祖细胞池。总而言之,我们成功地开发了一种MN 3D模型,并优化了可以应用其形态学,基因表达,蛋白质和功能性培养的工作流,随着时间的流逝。