使用含有蛋白酶抑制剂的RIPA裂解缓冲液(Keygen,Nanjing,中国)从大脑和肠道组织中提取蛋白质(PMSF; Biosharp; Biosharp,Hefei,中国)和磷酸酶抑制剂鸡尾酒(Medchem Express(Medchem Express,Shanghai,Chine))。用BCA蛋白质测定试剂盒(Keygen,Nanjing,中国)确定蛋白质浓度。用于蛋白质印迹,通过SDS-PAGE [10%(wt/vol)丙烯酰胺]分离样品(30 mg蛋白),然后转移到硝酸纤维素膜(NC; Pall Corporation,Mexico)中。然后将膜在5%BSA(Gentihold,北京,中国)中被阻塞,然后与兔子抗DRP1(1:1000,细胞信号技术),鼠标抗MFN2(1:1000,ABCAM),兔子抗LC3 A/B(1:1:1:1:1:1:1:1:1:1000,ABBIT ANBI-II III II II II II II II III II元素/uq ABS AB)兔抗复合物v/atp5a(1:1000,abcam),兔子抗SQSTM1/p62(1:1000,细胞信号技术),兔抗VDAC1(1:1000,
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