猪血凝性脑脊髓炎病毒(PHEV),猪假拟南芥病毒(PRV),经典猪发烧病毒(CSFV)和日本的脑炎病毒(JEV)导致感染猪的神经学症状相似,及其对实验性诊断的差异性诊断。设计了四对特定引物和探针,分别针对PHEV N基因,PRV GB基因,CSFV 5'非翻译区域(5'UTR)和JEV NS1基因,并且开发了四倍的实时定量RT-PCR(QRT-PCR(QRT-PCR),以检测和分化的PHEV,pRV,pRV,pRV,pRV,pRV,&JEV。该测定显示高灵敏度,每种病原体的检测极限(LOD)为1.5×10 1拷贝/μL。该测定法仅检测到PHEV,PRV,CSFV和JEV,而没有与其他猪病毒交叉反应。测定内和测定间的变异系数(CVS)小于1.84%,可重复性很高。通过已发达的四倍体QRT-PCR测试了总共1,977个临床样本,包括组织样本和从中国广西省收集的全血样本,以及PHEV,PRV,PRV,CSFV和JEV的阳性率为1.57%(31/1,977),0.355%(7/1,1,97), (21/1,977)和0.10%(2/1,977)。也通过先前报道的QRT-PCR分析测试了这1,977个样品,这些方法的巧合率超过99.90%。发达的测定法被证明是快速,敏感和准确的,用于检测和分化PHEV,PRV,CSFV和JEV。
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