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成功地,我们使用LFB开发了整个安装染色方案,以染色斑马鱼模型髓鞘和神经细胞。我们已经优化了LFB在整个生物体中穿透中枢神经系统的细胞成分。我们开发的染色方法成功地突出了斑马鱼发育中的大脑的神经解剖学。使用斑马鱼幼虫的LFB髓磷脂染色程序的流程图如图1所示。此外,我们的修改协议还达到了斑马鱼大脑结构的整个固定染色,而无需构成样品结构。我们在斑马鱼标本中使用了4%的常规固定剂(常规固定剂)。在固定过程之前,用蛋白酶K处理斑马鱼样品。蛋白酶K处理可显着改善污渍渗透到整个固定标本中。之后,蛋白酶K处理斑马鱼在4°C下放置在固定剂中过夜。对于其他透化,我们使用Triton X-100洗涤剂来改善染色渗透,而不会影响固定样品的结构形态。在使用卢克索快蓝色和甲三角紫的斑马鱼标本的染色过程中显示(图2)。

斑马鱼使用卢克斯快速蓝色染色

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