在真核生物中,双链断裂(DSB)可以通过同源重组(HR)或非同源最终连接(NHEJ)修复。在体细胞中,人力资源非常不具体。因此,绝大多数DSB通过NHEJ的两种不同途径进行修复。经典(CNHEJ)途径取决于het-rodimer ku70/ku80,而聚合酶theta(polq)(polq)是替代(anhej)途径的核心。令人惊讶的是,即使两种途径受损,拟南芥植物也是可行的。但是,它们表现出严重的生长迟缓和生育能力降低。有丝分裂过轴酶的分析表明,双突变体的特征是由于DSB修复缺陷而导致染色体碎片的急剧增加。与单个突变体相反,发现双突变体对诱导DSB的基因毒素博来霉素高度敏感。因此,这两种途径都可以在DSB修复中相互补充。我们推测,在没有NHEJ途径的情况下,HR可能会增强。这对于基因靶向(GT)特别有吸引力,其中使用同源模板引入了预定的变化。不期望的是,与野生型植物相比,POLQ单突变体和双突变体的GT频率明显较低。因此,我们能够证明消除两种NHEJ途径并不对农业介导的GT构成有吸引力的方法。但是,我们的结果清楚地表明,CNHEJ的损失导致GT频率的增加,这对于使用Planta GT策略的实践应用特别有吸引力。
主要关键词