XiaoMi-AI文件搜索系统
World File Search SystemORF
使用CAS9或DCAS9靶向常染色体ceratis capitata变压器基因，以使XX个体成为男性化的XX个体，而无需诱导突变
背景：地中海果蝇的女性Capitata（Medfly）是主要的农业害虫，因为它们将鸡蛋放入数百种植物的水果作物中。在Medfly中，女性确定是基于CCTRANSFORMER（CCTRA）的激活。CCTRA的母体贡献是需要在XX胚胎中激活CCTRA，并通过女性特异性的替代剪接来开始和表观上保持CCTRA阳性反馈回路，从而导致女性发育。在XY胚胎中，确定雄性基因（MOY）的雄性阻断了这种激活，CCTRA会产生编码截短的CCTRA同工型和男性分化的男性特异性转录本。结果：为了诱导第一个编码外显子中的移码突变，以破坏女性特异性和较短的男性特异性CCTRA开放式阅读框（ORF），我们在胚胎中注射了Cas9核糖核蛋白（Cas9和单个指导RNA，SGRNA，SGRNA，SGRNA，SGRNA）。由于这种方法大多导致单相关突变，因此在携带双重突变的G 1 XX个体中，男性化才预计，在G 0注射个体的交叉之后。令人惊讶的是，这些注射仅XX胚胎导致了G 0成人，不仅包括XX女性，还包括50％的肥沃XX雄性。G 0 XX雄性表达男性特异性CCTRA转录本，表明完全男性化。有趣的是，在六个G 0 XX男性中，有四个显示了CCTRA野生型序列。这一发现表明，Cas9-SgrNA注射的男性化与其诱变活性无关。与这种观察结果一致，通过死亡的Cas9（酶促无活性，DCAS9）将CCTRA的胚胎靶向XX胚胎，也有利于胚胎和成人中CCTRA的男性特异性剪接。
Lucrecia Martel -Paris
将于2004年跟随NinâSanta（圣诞节女儿），然后是2008年的无头妇女（Mujer Sin Cabeza），两人都在戛纳节（Cannes Festival）中被选中，距离电影制片人的家人几公里。在这部“萨尔塔三部曲”中 - 以该国北部的乡村和保守省的名字命名，在1960年代后期，电影制片人在一个大家庭中在阿根廷长大 - 卢克雷西亚·马特尔（Lucrecia Martel）在她的童年时代建立了她的故事，以更好地揭露福音，以更好地揭露疾病，家庭，社会，政治，政治，政治。这项有机工作在缺乏和过度之间不断张开，声音作品是金色的，迄今为止是十多部短片和四部长片，最后一部到达了我们的故事是Zama，2018年。在其中爆炸了所有问题，这些问题今天跨越了马特尔的工作，殖民化，否认，集体，基本的重新重新制定多数故事。
微生物生物技术
1。为学生提供有关基因组学和蛋白质组学的基本知识2。对基因组映射，结构/功能基因组学，基因组学和蛋白质组学涉及的技术的广泛知识。课程内容单元1：OMICS的基因和基因组介绍；基因组学类型；基因：orf;外显子；内含子；原核，真核和线粒体/叶绿体基因组； shot弹枪DNA测序； c-value＆paradox;人类基因组项目。单元2：基因组图和分析基因组映射的基因表达类型；涉及基因组图和基因表达分析的技术（RFLP，RAPD，SSCP，SSLP，STS，RT-PCR； DD-PCR，SNP，FISH，FISH，NUCLEASE保护测定，分子杂交）。单元3：蛋白质组学概念和蛋白质组成分的基础；蛋白质组学在生物学功能中的重要性；蛋白质 - 蛋白质相互作用和研究它的方法：蛋白质阵列，交叉链接方法，亲和力方法，酵母杂种系统。单元4：蛋白质质谱法（MS）的质谱分析 - 肽质量指印，质量精度，分辨率，灵敏度；离子来源：电喷雾电离，基质辅助激光解吸和电离；质量分析仪：四极，离子陷阱，飞行时间，圆形，傅立叶 - 转换离子回旋共振，混合分析仪；探测器； MS-MS; LC-MS。教科书：-1。基因组分析和基因组学原理S.B. Primrose和R.M. Twyman，第三版（Blackwell Publishing）。2。Liebler，“蛋白质组学简介” Humana出版社3。Conard，爱德华。 基因组学。 2.Pennington，SR，Dunn MJ，“蛋白质组学：功能的蛋白质序列”。Conard，爱德华。基因组学。2.Pennington，SR，Dunn MJ，“蛋白质组学：功能的蛋白质序列”。Apple Academics参考书：-1。ODD RW，Primrose SB，“基因操纵原理，基因工程概论”，Blackwell Science Publications。viva书3.生物技术的质谱法：Gary Siuzdak。
B细胞恶性肿瘤的正向和反向遗传学 硝酸盐对高血压患者口服微生物组和唾液生物标志物的影响 潮汐流与风能：与混合系统中短期存储结合使用的循环功率的值
癌症基因组测序已鉴定出数十个突变，在淋巴作用和白血病发生中起作用。验证负责B细胞肿瘤的驱动突变的验证是值得研究的突变体积以及由B细胞发育不同阶段引起的多个突变的复杂方式而变得复杂的。小鼠的正向和反向遗传策略可以提供对人类驱动基因的互补验证，在某些情况下，这些模型的人肿瘤的比较基因组学指导了对人类恶性肿瘤中新驱动因素的鉴定。我们回顾了使用插入诱变，化学诱变和外显子组测序进行的前向遗传筛选的集合，并讨论如何使用人类肿瘤基因组识别插入性诱变筛查中插入性诱变筛查中的高渗透覆盖范围如何鉴定在无法使用人类肿瘤基因组的速度下进行合作的突变。我们还比较了一组从PAX5突变小鼠中进行的独立进行的筛选，该筛网会在人类急性淋巴细胞性白血病（ALL）中观察到的一组常见突变集合。我们还讨论了使用CRISPR-CAS，ORF和SHRNA的反向遗传模型和筛选，以提供高吞吐量的体内证据，以实现致癌功能，重点是使用经体培养细胞的收养转移模型。最后，我们总结了在体内环境中提供候选基因的时间调节的小鼠模型，以证明其编码蛋白作为治疗靶标的潜力。
T231E突变体，在阿尔茨海默氏病中模仿Tau的病理磷酸化会导致线粒体展开的蛋白质反应激活I
触摸神经元。CRISPR-CAS9基因编辑用于将磷酸化T231A，磷酸化模拟T231E和乙酰基模拟的K274/281Q突变引入Tain4 Orf。为简单起见，这些突变体将称为T231A，T231E和K274/281Q。（b，c）第3天的触摸神经元的荧光图像，表达dendra2 :: Taut4转化融合和T231E突变体的单拷贝转基因编码。虚拟的圆圈表示PLM细胞体的位置，显示在插图中。比例尺，0.5 µm。注意，斑点荧光来自后肠中标记为GFP的HSP-60表达式。（c，d）成年第3和第10天，对面板A中列出的菌株的PLM细胞体荧光定量。数据是来自两个独立技术重复的平均值±SD。各个数据点从单独动物的单个PLM细胞中划分值（n = 25±5）。统计分析是通过Tukey的事后测试进行的双向方差分析，在比较包围样品时，*** p <0.001。请注意，左侧条形柱是指单独携带Dendra2报告基因的转基因菌株的荧光定量，而右侧则是指携带Dendra2和HSP-60记者的菌株。（e）表达整合的UPR MT报告基因P HSP-60 :: GFP和单拷贝MOSSCI插入的转基因蠕虫的代表性荧光图像。比例尺，0.5毫米。数据是平均±SD（来自两个独立生物学重复的20只动物）。（f）从面板中列出的菌株的后肠道区域中荧光信号强度定量。ns表示不显着，如通过单向方差分析计算，然后进行Tukey的多重比较测试。
lovis4u：比较基因组学的基因座可视化工具
可用性和实现：Lovis4U在Python3中实现，并在Linux和MacOS上运行。命令行接口涵盖了最实际的用例，而提供的Python API允许在Python程序中使用，集成到外部工具中以及其他自定义。源代码可在github页面上获得：github.com/art- egorov/lovis4u。详细的文档，其中包括示例驱动指南，可以从软件主页上获得：art-egorov.github.io/lovis4u。简介微生物基因组数据库的指数增长已解锁了许多比较基因组分析的机会（1）。各种任务，例如对基因邻域保护的分析（2,3），功能短ORF（4,5）的注释以及基因组变异性热点（6-8）的研究通常需要可视化多个基因组基因局基因局基因局基因局基因局基因局。为此目的开发了几种软件工具。这些子集具有图形用户界面（GUI），例如Artemis比较工具（9），EasyFig（10），Genespy（11）和Geneious Prime（Geneious.com）。另一个类别包括基于Web的应用程序，例如基因图形（12）。此外，还有库，例如r套件genoplotr（13）和gggenes（14），以及python包装Genomediagram（15）。一些工具集成了多种方法，创建混合解决方案。例如，GenView是一种与交互式Web应用程序（16）相结合的Python管道（16），Clinker＆ClusterMap.js（17）是一种流行的工具，具有命令行界面和可以生成矢量图形的交互式Web应用程序。尽管这些工具中的许多工具都通过GUIS或Web应用程序具有交互性，但缺乏适用用户友好的命令行工具
USP mRNA 疫苗章节
几十年来，人们一直在探索利用信使核糖核酸 (mRNA) 技术来研发流感、寨卡病毒、狂犬病和巨细胞病毒等传染病的疫苗。COVID-19 疫情加速了该技术作为疫苗平台的研究和开发，导致 mRNA 疫苗成为美国首个获得紧急使用授权并随后获批用于 SARS-CoV-2 的疫苗。用于预防 COVID-19 的 mRNA 疫苗已被证明是该技术的成功应用，然而，对于检测这些疫苗质量属性的指导仍然有限。一套标准的分析方法将为世界各地的疫苗开发商、制造商、监管机构和国家控制实验室提供支持，通过提供工具来帮助加速使用该平台开发安全有效的疫苗，并防止出现劣质和伪造的疫苗产品。根据各利益相关方确定的这一需求，USP 和我们的 BIO3 专家委员会制定了 mRNA 疫苗的通用章节草案，作为制定 mRNA 疫苗测试程序章节的第一步。本章节包括分析程序和最佳实践，以支持对 mRNA 疫苗的共同质量属性进行评估。本章节草案还以一般章节<1235>《人用疫苗——一般考虑因素》和<1239>《人用疫苗——病毒疫苗》中描述的最佳实践为基础。章节草案中的方法改编自公开来源，尚未经过 USP 的核实或确认。USP 和我们的 BIO3 专家委员会将提前发布章节草案以征求公众意见。通过提前发布，USP 希望征求利益相关者对参考文件中描述的方法的反馈，并鼓励提交与章节草案中提出的方法相关的任何替代方法和任何其他支持文件，包括验证文件。引言天然存在的 mRNA 是在真核细胞中通过 RNA 聚合酶转录细胞核中的 DNA 来产生的。 mRNA 分子从细胞核运输到细胞质，在那里它们作为模板，由核糖体翻译产生特定的蛋白质。通过这种方式，储存在细胞核中的信息被用来产生特定的蛋白质。这种 mRNA 不能产生除其编码的蛋白质以外的任何蛋白质。注射后，mRNA 的估计半衰期约为 8-10 小时，之后它会迅速降解并被体内的天然 RNase 分解。mRNA 不需要进入细胞核即可发挥作用。通常，可以通过在宿主（例如大肠杆菌）中扩增起始 DNA 质粒来制备 mRNA 疫苗药物物质。质粒在用于大规模生产 mRNA 中间体之前，需要进行酶线性化和纯化。在无细胞系统中，通过体外转录从线性化质粒 DNA 模板中产生 mRNA。根据具体的制造工艺，构建体用核苷优化以形成序列，转录的 mRNA 在 7-甲基鸟苷的 5' 端酶促加帽和/或在 3' 端用 poly (A) 酶促加尾。然后纯化 mRNA 药物物质并配制成药物产品。mRNA 疫苗药物产品可以是嵌入脂质纳米颗粒 (LNP) 中的 mRNA 制剂。LNP 保护 mRNA 免于降解并帮助 mRNA 通过内吞作用进入细胞。一旦进入内体，mRNA 疫苗分子就会逃离内体进入细胞质（取决于可电离脂质和 mRNA 核苷酸的摩尔比）并提供模板以产生多个病毒蛋白拷贝。病毒蛋白作为抗原刺激免疫反应，这是疫苗接种的预期结果。目前已开发出两种主要形式的 mRNA 疫苗：非复制型 mRNA 疫苗（常规）和自扩增型 mRNA (SAM) 疫苗，如下图 1 所示。常规非复制型 mRNA 疫苗构建体通常由 5′ 7-甲基鸟苷帽结构、5′ 非翻译区 (UTR)、编码蛋白质的开放阅读框 (ORF)、3′ UTR 和 3′ poly(A) 尾组成。SAM mRNA 疫苗源自 alpha 病毒基因组，其中 mRNA 分子编码可指导细胞内 mRNA 扩增的其他复制酶成分。在这两种形式的 mRNA 疫苗中，UTR 区域对于最大化蛋白质表达、mRNA 分子的 5′ 加帽、阻断核酸外切酶介导的降解和提高翻译效率都很重要。UTR、5' 帽和 poly(A) 尾也有助于稳定非复制型 mRNA 疫苗（常规）和自扩增型 mRNA (SAM) 疫苗，如下图 1 所示。常规非复制型 mRNA 疫苗构建体通常由 5′ 7-甲基鸟苷帽结构、5′ 非翻译区 (UTR)、编码蛋白质的开放阅读框 (ORF)、3′ UTR 和 3′ poly(A) 尾组成。SAM mRNA 疫苗源自 alpha 病毒基因组，其中 mRNA 分子编码可指导细胞内 mRNA 扩增的其他复制酶成分。在这两种形式的 mRNA 疫苗中，UTR 区域对于最大化蛋白质表达、mRNA 分子的 5′ 加帽、阻断核酸外切酶介导的降解和提高翻译效率都很重要。UTR、5' 帽和 poly(A) 尾也有助于稳定非复制型 mRNA 疫苗（常规）和自扩增型 mRNA (SAM) 疫苗，如下图 1 所示。常规非复制型 mRNA 疫苗构建体通常由 5′ 7-甲基鸟苷帽结构、5′ 非翻译区 (UTR)、编码蛋白质的开放阅读框 (ORF)、3′ UTR 和 3′ poly(A) 尾组成。SAM mRNA 疫苗源自 alpha 病毒基因组，其中 mRNA 分子编码可指导细胞内 mRNA 扩增的其他复制酶成分。在这两种形式的 mRNA 疫苗中，UTR 区域对于最大化蛋白质表达、mRNA 分子的 5′ 加帽、阻断核酸外切酶介导的降解和提高翻译效率都很重要。UTR、5' 帽和 poly(A) 尾也有助于稳定
补充图1
补充图 1 | ERD7 转基因拟南芥突变株系的生成和表征。（A）根据 TAIR 提供的信息，描绘了拟南芥 ERD7 ORF (AT2G17840.1) 的插图，左侧为 5' 端。标示了 ERD7 基因外显子（框）和内含子（线）以及在相应的单拷贝、T 3 纯合 erd7-1 和 erd7-2 突变株系中针对 CRISPR/Cas9 基因组编辑的 T-DNA 插入和 sgRNA 区域的相对位置。还显示了 (C) 中用于基因分型和 RT-PCR 分析的引物对的相对位置。 (B) 野生型和 erd7-2 突变株系中 ERD7 基因和蛋白质的核苷酸和推导多肽序列的比较，表明 ERD7 基因（和相应的转录本）中预期有 1711 个核苷酸缺失，导致 erd7-2 突变株系中编码蛋白质有 398 个氨基酸缺失。ERD7 野生型和 erd7-2 突变体 DNA 序列中 CRISPR/Cas9 原间隔区相邻基序带下划线。使用 ClustalO 算法 (ebi.ac.uk/Tools/msa/clustalo) (Madeira et al., 2019) 对野生型和突变型 ERD7 蛋白质的推导氨基酸序列进行比对。(C) erd7-1 和 erd7-2 突变株系的 PCR 和 RT-PCR 分析。图中显示的是从 15 天大的 WT、erd7-1 和 erd7-2 植物的莲座叶中提取的 gDNA 的 PCR 分析（上图）和 mRNA 的 RT-PCR 分析（下图），并使用所示引物对进行评估；引物对的位置参见 (A)。有关用于生成和表征两个 erd7 突变系的所有引物序列，另请参阅补充表 1。通过 DNA 凝胶电泳和溴化乙锭染色分析 PCR 产物和 RT-PCR 产物。注意，在两个突变系中均不存在分别对应于 ERD7 基因和 ERD7 表达（即转录本）的 PCR 和 RT-PCR 产物，而 erd7-1 突变体中存在 T-DNA，这与预期一致。拟南芥 TUB4 用作内源对照。
HEPTAVAC® P Plus – 库存有限或缺货情况
• 减少压力——压力会导致梭菌病和巴氏杆菌病。压力可能由聚集、处理、施用产品或药物、混合群体、移动、天气突然变化、担心狗等引起。 • 营养充足——动物应保持良好的身体状况，但不能肥胖。营养突然变化会导致患病，因此应逐步进行任何变化。 • 避免过去绵羊曾患过梭菌病或巴氏杆菌病的田地/环境——一些梭菌细菌生活在土壤中，似乎与某些田地更相关。被扰动的土壤会增加风险，因此避免在田地中进行地基工程等。秋季将绵羊转移到甜菜或其他饲料作物上也会增加患病风险。 • 确保动物健康——确保它们没有蠕虫，跛行得到控制，在有风险的地方控制吸虫，并且它们没有患有任何其他可能降低其免疫力的疾病（例如 MV、Johnes、CLA、Orf、OPA）。• 良好的卫生条件——在产羔时，所有设备和人员都应一丝不苟地清洁，羔羊肚脐必须浸湿，标记、断尾和阉割必须按照最高标准进行。• 良好的初乳管理——羔羊在出生后的前 24 小时内必须接受 200ml/kg 的初乳，并且在出生后的 2-4 小时内必须喂食 200ml。• 管理环境——如果动物在室内；干净的垫料，定期更换，充足干净的淡水，充足的营养且易于获取，不拥挤，通风良好，脚下干燥。如果羊在室外；确保围栏符合良好标准，并且草不会被吃掉，只剩下裸露的土壤 - 如果需要，提供补充营养。 • 管理微量元素 - 可以进行血液测试以确定缺陷并提供补充剂。
鬃狮蜥腺病毒 1 的完整基因组序列含有三个编码 C 型凝集素样结构域超家族蛋白的基因
鬃狮蜥腺病毒 1 (BDAdV-1)，也称为鬣蜥腺病毒 1，已被全世界描述为内陆鬃狮蜥 (Pogona vitticeps) 的一种流行传染性病原体，鬃狮蜥是一种最常见的有鳞外来宠物爬行动物。之前有限的腺病毒 DNA 聚合酶和六邻体基因序列数据表明，BDAdV-1 是腺病毒科 Atadenovirus 属的成员。Atadenovirus 会感染反刍动物、有袋动物、陆龟类爬行动物和鸟类，但已证明该属源自有鳞爬行动物。在这里，我们报告了一项筛查调查以及 BDAdV-1 的完整基因组序列，该序列直接来自一条死去的幼年鬃狮蜥样本，该幼年蜥蜴在去世前表现出中枢神经系统症状。BDAdV-1 基因组为 35,276 bp，包含 32 个推定基因。它的基因组组织是 Atadenovirus 属成员的特征，然而，发散的 LH3 基因表明与其他属成员（如蛇腺病毒 1）相比，其结构相互作用具有不同的性质。我们鉴定了五种新型开放阅读框 (ORF)，其中三种编码 C 型凝集素样结构域 (CTLD) 超家族的蛋白质。ORF3 具有 CTLD II 组样结构域结构，显示出与自然杀伤细胞表面受体和用于神经趋向性的 α 疱疹病毒毒力因子基因 UL45 的结构相似性。与典型的腺病毒右端基因相比，ORF4 和 6 非常长，可能编码具有新型、以前未描述过的结构域结构的 CTLD 超家族成员。BDAdV-1 是迄今为止 Atadenovirus 属中最具发散性的成员，为腺病毒的多样性、进化和发病机制提供了新的见解。