摘要背景:明确的启动子是所有生物体遗传研究的基本要素,能够控制内源基因的表达、转基因表达和基因编辑。尽管如此,啮齿动物感染性疟原虫的明确启动子仍然很少。约氏疟原虫尤其如此,它常用于研究疟疾感染的蚊虫阶段和肝脏阶段,以及宿主对感染的免疫反应。方法:从寄生虫的整个生命周期中选择了六个启动子( clag-a 、 dynein heavy chain delta 、 lap4 、 trap 、 uis4 、 lisp2 ),文献中提到这些启动子以阶段特异性的方式控制其基因。还确定了赋予强表达水平的组成型 pybip 启动子的最小启动子长度,这对于报告基因和基因编辑酶的表达很有用。结果:相反,观察到这些启动子赋予了阶段富集基因控制,因为一些寄生虫也有效地在其他阶段使用这些启动子。因此,当单独使用这些启动子时,可能会使启动子交换、阶段靶向重组或基因编辑实验的结果解释复杂化。结论:这些数据表明,实现阶段特异性效应(例如基因编辑)可能最好使用双组分系统,其中独立的启动子活性仅在预期的生命周期阶段重叠。关键词:阶段富集启动子,基因编辑,约氏疟原虫,疟原虫
主要关键词