图 1. 质粒 QC 工作流程说明。从过夜细菌培养物开始,可使用 KingFisher 系统纯化 DNA。为了精确测定数量,在进行后续步骤之前,通过限制性消化将纯化的 DNA 线性化。对于无液滴数字 PCR (dPCR) 定量,将线性化的 DNA 与 Applied Biosystems ™ TaqMan ™ 检测试剂混合,装入 Applied Biosystems ™ QuantStudio ™ Absolute Q ™ MAP16 板中,并在 QuantStudio Absolute Q 数字 PCR 系统上运行。为了验证质粒序列,使用 Applied Biosystems ™ BigDye ™ Terminator 循环测序试剂盒对线性化的 DNA 进行循环测序。然后在 CE 和分析之前使用 Applied Biosystems ™ BigDye XTerminator ™ 纯化试剂盒清理反应物。或者,使用 Applied Biosystems ™ BigDye ™ 直接循环测序试剂盒对 DNA 进行扩增和测序。在 CE 和分析之前,使用 BigDye XTerminator 纯化试剂盒清理这些反应。