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DBCO-AF488 和 DBCO-AF555 与 CRM 197-叠氮化物结合,染料/CRM 197 摩尔比为 2-10 倍,25 µl 所需浓度的 DBCO-染料/DMSO 溶液与 200 µl (1 mg) CRM 197-叠氮化物和 175 µl PBS pH 7.2 的混合物。反应在 20°C 下混合 2 – 4 小时,然后在 37°C 下孵育过夜并通过透析纯化。染料/CRM 比率是根据吸光度计算的。
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