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机构名称:
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蛋白质的特异性RNase源:带有猪RNase抑制剂基因的重组大肠杆菌菌株。单位定义:1个单位定义为抑制50%cytidine 2',3'-循环单磷酸的水解所需的酶量,由5 ng的RNase A(1)抑制。分子量:74,828 Daltons质量控制分析:使用2倍连续性稀释方法确定单位活动。在1x RNase抑制剂反应缓冲液中制成酶的稀释液,并添加到含有1mm胞苷2',3'-环磷酸1mm的1000 µL反应中,其中包含100mm tris-tris-tris-tris-trisate,1mm Edta,1mm Edta,pH 6.5的1X反应缓冲液中的1μgrNase A。在286nm处的吸光度。蛋白浓度(OD 280)由OD 280吸光度的物理纯度确定,通过浓缩和稀释的酶溶液的SDS-PAGE,然后是银色染色检测。通过比较浓缩样品中污染物带的聚集质量与稀释样品中蛋白蛋白蛋白带的质量来评估纯度。单链核酸酶在含有放射性标记的单链DNA底物的50 µL反应中确定,在37°C下孵育4小时4小时。双链外切核酸酶在50 µL反应中确定,该反应含有放射性标记的双链DNA底物和10 µL的酶溶液在37°C下孵育4小时。双链核酸内切酶在50 µL反应中确定,该反应含有0.5 µg质粒DNA和10 µL的酶溶液在37°C下孵育4小时。

rNase抑制剂

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