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传统上，采用多瘤病毒DNA复制分析的选择性低分子量DNA提取HIRT提取方法，一种多步骤，劳动密集型和耗时的程序。DNA复制结果在复制样品之间通常不一致。为了提高多瘤病毒DNA复制测定法的效率和可重复性，我们使用Qiagen自旋柱技术和HIRT提取技术比较了DNA质量和产量。在转染后第2、4和第6天收集了用SV40 DNA转染的CV-1细胞，并使用Qiagen自旋柱和HIRT提取方法提取DNA。使用32个P线性的全长SV40 DNA探针进行了南部杂交。病毒DNA复制进行定量，并比较了两个程序获得的结果。Southern印迹分析显示，使用Qiagen自旋柱技术恢复了一致和增强的SV40 DNA恢复，并且在6天期间的病毒DNA复制在一式三份样品中可重现。此外，Qiagen自旋柱技术减少了从24小时获得多瘤病毒复制测定的高质量DNA所需的时间。采用这种提取程序将改善多瘤病毒DNA复制活性的确定，同时减少研究者对有毒有机化合物的暴露和处置。©2004 Elsevier B.V.保留所有权利。
快速的体外多瘤病毒DNA复制测定
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