应该通过使用松弛的质粒进行对照反应来检查超涂层质粒,以表明该化合物不仅可以作为托波斯I的抑制剂,如果有可能。如果使用PBR322的松弛形式,这将显示化合物是否为介导器,但如果它也抑制了topo I(即假阴性是可能的:下面原理图的左手部分中的第5巷)。如果使用了PBR322的超涂层形式,则该化合物是否为介导器,但如果它是Topo I的抑制剂(即假阳性是可能的:下面原理图的右手部分中的泳道6)。但是,如果与化合物相比,小麦细菌topo I的过量是过量的,使得与存在的酶的量相比,任何抑制活性都是无关紧要的,那么任何插入都将显而易见。这假定任何抑制活性是由于与酶的相互作用而不是预防酶活性的插入。