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我们描述了一种简单而有效的技术,该技术允许在任何包含倒置ATTP盒的着陆点附近对果蝇基因组序列进行无疤痕的工程,例如模拟插入。这种两步方法结合了PHIC31积分酶介导的位点特异性和归纳核酸酶介导的局部重复分辨率,有效地将原始的着陆点等位基因转换为修改等位基因,仅具有所需的变化。纳入此方法中的主要标记允许在每个步骤中对正确的单个平流进行效率。原则上,单个ATTP站点和FRT站点也是有效的着陆点。鉴于较大且越来越多的着陆点线可用,因此该方法提供了一种简单而快速的方法,可以以无忧的方式对大多数果蝇基因组进行有效编辑。此技术也应适用于其他物种。

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