图 5 . 基于 CRISPR-Cas9 的 pepC 和 sacB 基因多重基因组编辑。(A)以 mRFP 或 sfGFP 为目的基因的单基因缺失、多重缺失和多重整合的结合和编辑效率。Y 轴上提供结合效率(灰色)和编辑效率(橙色)。编辑效率条顶部的数字表示筛选的接合子总数。误差线表示标准偏差。在确定编辑效率之间的显著差异时,考虑 P 值 < 0.05(* p < 0.05;** p < 0.01)。与单基因缺失和多重缺失相比,多重 mRFP 整合具有显著差异,与单基因缺失相比,多重 sfGFP 整合也具有显著差异。 (B) P. polymyxa 突变体的显微图像,其中 sfGFP 取代了 pepC 和 sacB 基因。(左) 明场图像;(右) GFP 通道。(C) 筛选过程中获得的野生型和突变体的比例以饼状图形式提供。