去除未转化根并在 4-7 周后对转化植物的共生表型进行评分(图 4)。用空载体或靶向 NCR068 的构建体转化的植物的地上部分没有表现出氮缺乏的症状(图 1a、c),用靶向基因 NCR089、NCR128 和 NCR161 的构建体转化的植物表现出相似的生长习性(未显示数据),表明这些植物具有有效的共生固氮能力。用四种选定 NCR 的 sgRNA 构建体转化的根上形成的根瘤细长且呈粉红色,表明它们是功能性根瘤(图 4j、l、n、p)。用 SYTO13 对根瘤切片进行染色,结果显示,针对基因 NCR068、NCR089、NCR128 和 NCR161 诱变的根瘤的细菌定植与在空载体转化的