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图 12. Sanger 法。A) 双脱氧核苷酸 (ddNTP) 的结构与脱氧核苷酸 (dNTP) 相似，只是缺少 3'OH 基团。B) 当荧光标记的 ddNTP 被掺入 DNA 链时，合成会停止。在包含不同 ddNTP 的反应中，DNA 片段合成可以在不同点终止。然后根据大小分离合成产物，并使用荧光标记来确定序列中添加核苷酸的顺序。基因组很大 - 通常有数百万个碱基对 - 因此无法在一个步骤中端到端测序。要对基因组进行测序，必须首先将其 DNA 分解成较小的片段，并对每个片段进行单独测序。特定 DNA 片段的既定碱基顺序称为“序列读取”。然后利用计算工具组装各种片段并推断出起始基因组的序列。这个过程在历史上被称为“散弹枪测序”。人类基因组计划 (HGP) 是全基因组 DNA 测序的首次重大尝试，由美国国立卫生研究院牵头。HGP 于 2003 年完成，利用桑格测序法对来自多个个体的 DNA 的基因组克隆进行测序，以生成人类基因组的代表性序列。
核酸分析技术。......
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