我们的实验室试图了解大分子的3D结构与其功能有关。核糖体,尤其是真核细胞中的细胞断核糖体,是我们最喜欢的成像样品。细胞器核糖体由于根据内共生理论与细菌细胞的历史联系,与整体形态中的细菌核糖体相似,但是一旦在高分辨率下确定结构,就很容易观察到蛋白质和rRNA成分的添加和缺失。这些修饰源于在真核细胞环境中的演变过程中适应的必要性。我们想以高分辨率推断细胞器核糖体结构,以便我们可以高精度地推断出这些变化的结构和定位。我们的管道将涉及蔗糖密度梯度超速离心对细胞器核糖体的天然源纯化,通过冷冻EM进行成像和图像处理,以生成此类核糖体不同构象状态的结构。这项工作的随后扩展将是图像各种翻译因子以及核糖体的相互作用的结构和模式。总的来说,我们希望生成有关真核细胞内细胞器环境中翻译机制和翻译调节的重要数据。
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