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CRISPR-Cas9 介导的诱导多能干细胞基因编辑成为一种有效的工具，可用于研究遗传驱动疾病的生物学机制，同时考虑各自的遗传背景。该技术依赖于针对目标基因中存在的特定核苷酸序列。因此，某些基因的基因编辑可能因非编码假基因而变得复杂，这些假基因与其各自的基因具有高度的序列同源性。其中，GBA 引起了特别的关注，因为它是帕金森病最常见的遗传风险因素。在本研究中，我们提出了一种易于使用的 CRISPR-Cas9 基因编辑策略，允许对基因中的点突变进行特定编辑，而无需对其假基因进行遗传改变，例如在 GBA 中纠正或插入常见的 N370S 突变。通过结合荧光和 PCR 筛选的质量控制策略，可以早期识别正确编辑的克隆，并明确识别其假基因 GBAP1 的状态。功能验证证实基因编辑成功。我们的工作首次基于 CRISPR-Cas9 对 GBA 中的点突变进行编辑，并为由于存在假基因而技术要求高的基因工程铺平了道路。
假基因使基于 Cas9 的基因编辑变得复杂
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